孔石莼多糖的分离和结构研究
孔石莼(UIva pertusa Kjellm)是一种广泛分布于太平洋沿岸的大型野生绿藻,具有软坚散结,利水消肿之功效,为我国一种传统的药用海藻。本文以孔石莼为原料,通过各种提取分离纯化技术,获得了多种水溶性多糖组分,采用各种化学方法和现代仪器分析技术,对它们的理化性质和结构进行了研究,确定了其中两种多糖组分UW1N和UW2N的基本结构,并对其抗凝血活性进行了初步研究。
孔石莼藻体粉末经冷水、热水和热碱等方法依次进行提取,制备得到孔石莼多糖粗品UCPS、UWPS及UAPS,并采用化学方法和波谱学方法对水溶性多糖组分UCPS和UWPS的理化性质进行了分析研究。结果表明,UCPS和UWPS是以鼠李糖为主要组成的硫酸化多糖。其中,UCPS的单糖组成主要为鼠李糖,其次为木糖、葡萄糖及少量半乳糖,而UWPS则含有高达90[％]鼠李糖及少量木糖;两者均含有较高的硫酸基(24.99[％],17.88[％]);并且糖醛酸含量较高,而蛋白含量较低;UCPS和UWPS的重均分子量分别为324kD和310kD。核磁共振氢谱及红外光谱分析进一步证实水溶性多糖UCPS和UWPS均含有鼠李糖、糖醛酸和硫酸基。
利用离子交换色谱和体积排阻色谱分别对UCPS和UWPS进行了分离纯化,获得四种多糖组分UCW、UC1N、UW1N和UW2N,并对它们的理化性质进行了分析研究。结果表明,UCW、UC1N、UW1N和UW2N在Shodex OHpakSB-804 HQ柱上均显示单一对称峰,分子量分别为310kD、578kD、383kD和457kD。这四个多糖组分的硫酸基含量分别是19.20[％]、22.22[％]、12.37[％]和23.67[％],糖醛酸含量分别为12.45[％]、32.09[％]、36.44[％]和22.58[％]。
在上述研究基础上,运用各种化学分析方法(碳二亚胺法还原,高碘酸氧化,Smith降解,甲基化)和波谱学方法(红外光谱,核磁共振波谱,气质联用等)对UW1N和UW2N的结构进行了研究,确定了UW1N和UW2N的主链结构、糖基组成及分支情况,并分析提出了它们的可能结构单元。结果揭示,UW1N及UW2N主要以鼠李糖、木糖和葡萄糖醛酸组成的多糖骨架，硫酸基和糖链分支主要连接于该骨架上，其分子量为375 kD及389kD；多糖链主要由1→4,1→2，3，4，1→2，4，1→3，4连接的鼠李糖和1→4连接的木糖、l→3连接的葡萄糖醛酸构成；多糖的分支点主要位于鼠李糖上；糖链末端为葡萄糖醛酸；硫酸基主要连接于鼠李糖的3位。利用活化部分凝血活酶时间和凝血酶原时间对UWlN和UW2N的抗凝血活性进行了初步研究。结果表明，孔石莼多糖UWlN和UW2N具有一定的抗凝血活性，但与肝素相比，其抗凝血活性较低。
本文对孔石莼多糖的提取、分离纯化、理化性质和结构进行了系统的研究，并初步研究了两种多糖组分的抗凝血活性，为进一步开展孔石莼多糖的功效关系研究提供了重要的结构信息，为孔石莼资源的开发利用提供了有价值的参考咨料。
孔石莼多糖;提取;分离纯化;抗凝血活性
中国海洋大学
硕士
生药学
毛文君
2006
中文
R282.77;R284.2
88
2007-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）