灰树花糖蛋白GF6F2的结构及其理化性质研究
灰树花(Grifola frondosa)是一种名贵的食用、药用真菌，具有增强机体免疫、抗肿瘤等多种生物活性，其中，灰树花多糖为其最主要的一类生物活性成分。目前，发酵工程技术已对灰树花进行大规模发酵，使灰树花发酵菌丝体成为灰树花多糖的主要来源。
本文以灰树花发酵菌丝体为原料，经过一系列脱脂、水提及碱提等工艺，得到一种热碱提水溶粗多糖组分GF6(得率6.8％)。GF6经过离子交换及凝胶排阻层析分离纯化得到一种含有少量蛋白质的多糖GF6F2(得率2.4％)。在应用薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)、红外光谱(IR)、紫外光谱(UV)、核磁共振波谱(NMR)等化学及仪器分析方法得到其初步结构信息的基础之上，本文又利用了高碘酸(HIO<,4>)氧化、Smith降解、甲基化反应、乙酰解反应、酸解反应等化学方法和高效液相色谱法(HPLC)、气质联用(GC-MS)、电喷雾质谱(ESI/MS)、1D，2D-NMR等仪器分析方法对其结构进行了深入的研究。推断多糖GF6F2分子量为187kD，属于复杂的多分支的β-1.3-/β-1.6-葡聚糖。GF6F2糖链部分以β-1，3-Glc为主链，β-1，6-GIc为分支的结构，β-1.6-Glc含量较大。GF6F2酸解产物AHFl为其相对简单的主链结构，其亦为β-1,3-GIc为主链，β-1，6-Glc为分支的结构，两者比例约为5：4。应用SDS-PAGE对GF6F2蛋白部分的研究，证明GF6F2中含有两条游离蛋白，分子量约在42.7kD～31kD之间，另少部分蛋白质与糖链结合较紧密，不易通过β-消除反应释放。刚果红结合实验表明，GF6F2具有三股螺旋的空间构象，该构象易受碱的影响，当GF6F2溶液在PBS(pH8)缓冲体系中时，其空间构象强碱性破坏的程度明显降低。
此外，本文又对GF6F2基本理化性质及初步稳定性进行了初步研究，为其质量标准的制定提供基础。
灰树花多糖;β-葡聚糖;分离纯化;结构分析;理化性质;稳定性
中国海洋大学
硕士
药物化学
于广利
2006
中文
R914
95
2007-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）