海洋真菌绮丽穗霉Spicaria elegans胞外多糖的分离与鉴定

张姗姗

中国海洋大学

摘要：

海洋微生物是筛选和发现抗肿瘤药物先导化合物的重要资源。分离自青岛胶州湾海泥的真菌绮丽穗霉spicaria elegans的次级代谢产物显示海虾致死活性，并对tsFT210细胞显示了细胞毒活性。在分析发酵液时发现其中存在大量的胞外多糖成分。本文从中分离纯化得到胞外多糖EPS，并对其进行单糖组成、结构和生物活性的初步研究。
发酵液经脱脂脱色、浓缩后进行醇沉，得到胞外多糖粗品，采用超滤膜分离法和凝胶柱层析法进行纯化，得到胞外多糖 EPS。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测得EPS的分子量为88 kD。运用TLC，GC，IR,NMR，GC/MS，以及高碘酸氧化、Smith降解分析，对EPS的结构进行了分析鉴定。薄层色谱法和气相色谱法分析表明，EPS是由甘露糖构成的均多糖，即甘露聚糖。红外光谱显示，814cm<'-1>为α-甘露糖特征吸收；<'1>H NMR显示，异头质子信号在偏低场δ5.3，验证了甘露糖为α构型。GC/MS，以及高碘酸氧化、Smith降解分析，显示多糖主链由l→2连接的甘露糖构成，侧链主要由l→4和1→6连接的甘露糖构成，侧链与主链之间以1→6糖苷键和1→3糖苷键连接为主，并含有少量1→4连接。
利用肿瘤细胞株MCF7，SF-268和NCI-H460对EPS进行抗肿瘤活性评价。结果表明，EPS对MCF7，SF-268和NCI-H460细胞株均未发现有明显的活性，其它生物活性正在测定中。
本文首次从海洋真菌发酵液中分离获得甘露聚糖，为其精细结构和生物活性研究提供了基础资料，对海洋微生物胞外多糖的研究具有参考价值。

关键词：海洋真菌;胞外多糖;分离纯化;甘露聚糖;真菌绮丽穗霉

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：药物化学

导师姓名：王长云

学位年度：2006

语种：中文

分类号：R927

页数：66

在线出版日期：2007-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）