英国和西班牙进口大菱鲆杂交子一代的杂种优势分析
自1992年引进我国以来，大菱鲆已发展成为我国北方沿海的一种重要经济养殖鱼类。但由于在苗种引进时受欧洲等苗种供应商的限制，及我国苗种生产过程中缺乏适当的育种规划，近交衰退的情况比较严重。因此，急需开展大菱鲆优良种质的培育工作。本研究对两个大菱鲆养殖群体——西班牙群体(S)和英国群体(E)的杂交子一代的杂种优势进行了研究，并利用AFLP技术从DNA水平上分析了杂种优势产生的原因。主要结果如下：
1、对两个大菱鲆养殖群体的杂交效果进行了分析。采用完全双列杂交法对两个大菱鲆养殖群体——西班牙群体(S)和英国群体(E)进行群体间杂交及群体内自繁，得到了S♂x S♀、F♂×E♀、S♂x E♀和E♂xS♀ 4个组合的子一代。并对各交配组合的受精率、孵化率、畸形率、30 日龄和70 日龄稚鱼的体长、质量等指标进行了比较。结果表明：杂交组与自繁组在受精率、孵化率及畸形率等方面不存在显著性差异；但杂交组在30 日龄和70 日龄稚鱼的体长、质量方面，与自繁组相比表现出不同程度的杂种优势。S♂×E♀组30日龄体长的杂种优势达到5.43％，E♂×S♀组70日龄质量的杂种优势达剑25.00％。实验初步显示，不同养殖群体间的杂交可有效地改良大菱鲆的生长性状。
2、对AFLP反应条件进行摸索，应、预扩增反应、选择性扩增反应、分析了DNA提取、双酶切反应、连接反银染等步骤进行了分析。结果表明，用EcoRI/MseI双酶切、核心序列加3个选择性碱基的选择性扩增引物、1:6(w:w)的EcoRI端与MseI端选择件扩增引物比和20μl选择性扩增体积，可得到十分稳定的结果。所得产物经电泳和银染后可获得条带清晰、背景干扰小的图像。扩增片段长度多态性(AFLP)技术足分析大菱鲆群体遗传变异的有效技术之一。
3、利用AFLP技术从DNA水平上分析了两个大菱鲆养殖群体杂交子一代的杂种优势产生的可能原因。应用AFLP技术对两个大菱鲆养殖群体--西班牙群体(S)和英国群体(E)的子一代杂交组合,即正交SE(S♂×E♀)、反交Es(E♂×S♀)--的杂种优势进行了分析。筛选了6对引物组合用于选择性扩增反应,共得到229条清晰稳定的扩增带,其中多态性位点184个,多态性位点比率为80.3[％]。子一代4个组合EE、SS、ES和SE的多态位点比例分别为69.47[％]、71.24[％]、74.78[％]和71.88[％];Nei基因多样性指数分别为0.264l,0.2521,0.2654和0.2683;Shannon多样性指数分别为0.3890,0.3722,0.3921和0.3965。SS与ES、SE的相对遗传距离分别为0.0913和0.1187;EE与SE、ES的相对遗传距离分别为0.0319和0.1673。由此发现,杂交子代与两亲本的遗传差异不是对等的,而是偏向各自的母本;系统聚类树、Shannon多样性指数同样证明了这一点。Nei基因多样性指数和Shannon遗传多样性指数均表明,子一代杂交组合的群体内遗传差异大于自繁组合子代,说明杂交组合子代的群体遗传多样性水平升高,可能与杂种优势的产生有一定关系。
大菱鲆;AFLP;杂交;杂种优势
中国海洋大学
硕士
遗传学
张士璀;孔杰
2006
中文
Q321.6;Q959.486
72
2007-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）