中国人群P450 2C9基因多态性与磺脲类药物代谢的关系
P4502C9是人体中重要的药物代谢酶。P4502C9在人肝微粒体中含量丰富，约占P450总量的20％。P4502C9能代谢许多不同性质的药物，并在前致癌物、前毒物和致突变剂的活化中也起一定作用。P4502C9具有遗传多态性，其中研究最多也是最主要的有三种即野生型P4502C9*1，突变体P4502C9*2和P4502C9*3。基因变异者的酶活性会明显降低，对P4502C9底物的代谢能力下降。本研究采用先进的基因芯片技术检测中国人群的P4502C9基因突变情况，并比较不同P4502C9基因型的个体对甲苯磺丁脲和格列美脲的药代和药效动力学的差异。
1.基因芯片法测定中国人群P4502C9基因多态性优化制备P4502C9等位基因(*2、*3、*4、*5)的分型芯片，利用基因芯片技术测定169例中国健康志愿者P4502C9基因型，并使用直接测序法对结果进行验证。在169例中国健康志愿者中共发现9名P4502C9*1/*3志愿者，1名P4502C9*3/*3志愿者，无P4502C9*2，P4502C9*4和P4502C9*5变异。中国人群P4502C9*3等位基因频率为0.03。该芯片系统的分型结果与直接测序结果完全吻合，所检测的等位基因频率与文献报道相接近。表明基因芯片法适用于中国人群P4502C9基因分型研究。
2.中国人群P4502C9基因多态性对甲苯磺丁脲药代和药效动力学的影响不同P4502C9*1/*1(n=53)、*1/*3(n=9)及*3/*3(n=1)基因型的中国汉族健康志愿者单次口服500mg甲苯磺丁脲后，收集24小时的血样和尿样，使用固相萃取-HPLC法测定血和尿中的甲苯磺丁脲及其代谢产物的浓度，根据药时曲线，采用DAS(R)软件分析甲苯磺丁脲的体内药代过程。同时监测志愿者血糖的变化，分析甲苯磺丁脲的药效动力学过程。甲苯磺丁脲药代动力学研究表明P4502C9*1/*3与P4502C9*3/*3基因型的受试者与P4502C9*1/*1基因型相比，AUC0→∞增加20％和116％，T1/2增加60％和813％，CL0为68％和11％，CLform仅为39％和3％。P4502C9*1/*3和P4502C9*3/*3志愿者的0-24小时代谢比例(MR0-24)仅为P4502C9*1/*1组的42％和12％。不同基因型的志愿者尿中排出的甲苯磺丁脲及其代谢产物总量也有明显的差别。但是主要药效学指标(血糖)没有显著差异。结果证明，P4502C9*1/*3对甲苯磺丁脲的代谢活性与P4502C9*1/*1相比显著降低，P4502C9*3/*3的代谢活性更低，呈现基因剂量关系，P4502C9基因型是P4502C9表现型的主要决定因素。甲苯磺丁脲可以作为中国人群P4502C9的探药。
3.中国人群P4502C9基因多态性对格列美脲药代和药效动力学的影响(1)、中国人群P4502C9基因多态性对单次口服格列美脲药代和药效动力学的影响本试验采用19例受试者(9名P4502C9*1/*1，9名P4502C9*1/*3，1名P4502C9*3/*3志愿者)单剂口服4mg格列美脲片，收集48h内的血样与尿样；HPLC方法测定血中格列美脲及尿中羧基格列美脲和羟基格列美脲的浓度，同时测定各血样的血糖浓度。计算分析格列美脲的药代动力学参数。格列美脲药代动力学研究表明P4502C9*1/*3与P4502C9*3/*3基因型的受试者与P4502C9*1/*1基因型相比，AUC0→∞增加28％及54％，T1/2增加63％和235％，CL0为78％和62％，CLform为68％和91％。血糖变化无显著性差异。P4502C9*1/*3组服用格列美脲和甲苯磺丁脲后与野生型相比，T1/2延长163％和198％，AUC0-t增加28％和45％，各种代谢物排出减少89％和48％，结果证明，P4502C9*1/*3对格列美脲的代谢活性与P4502C9*1/*1相比降低，*3/*3个体的代谢与*1/*3基因型相比降低更多。P4502C9*3位点的突变对甲苯磺丁脲的影响要远大于格列美脲。
(2)、中国人群P4502C9基因多态性对连续口服格列美脲药代和药效动力学的影响比较不同P4502C9基因型的中国健康志愿者连续口服4mg格列美脲后药代和药效动力学参数的变化。19例受试者(9名P4502C9*1/*1，9名P4502C9*1/*3，1名P4502C9*3/*3志愿者)连续口服格列美脲片4mg/人/天，连续给药6日。采集每天峰谷浓度是血样和最后一日完整的药时曲线所需样品，同时留取尿样，HPLC法测定血药和尿药浓度，测定血糖。计算分析格列美脲的药代动力学参数。连续给药后，P4502C9*1/*3志愿者与野生型志愿者相比T1/2延长124％，AUC0-t增加28％，MRT延长63％，口服清除率下降26％，P4502C9*1/*3组各时间段尿中排出的格列美脲代谢产物的总量均少于P4502C9*1/*1组，格列美脲在P4502C9*1/*3志愿者体内的代谢减慢，滞留时间延长。P4502C9*1/*3组降血糖效果更加明显，P4502C9*1/*3组志愿者的0-2小时和0-10小时的血糖下降值明显大于野生型志愿者。连续给药后，P4502C9*1/*3组的Cmax也比单次给药增加了43％，这说明P4502C9*1/*3在连续口服格列美脲的过程中可能出现了蓄积现象。结果证明，连续口服格列美脲后，P4502C9*3位点突变对格列美脲药代动力学的影响更加明显，同时也会影响格列美脲的降血糖作用。
综上所述，中国人群P4502C9基因多态性明显影响甲苯磺丁脲和格列美脲的药代动力学过程，在连续口服的情况下，会影响格列美脲的降血糖作用。
基因多态性;基因芯片;甲苯磺丁脲;格列美脲;药物代谢酶;磺脲类药物;药物化学
中国海洋大学
博士
药物化学
王睿
2005
中文
Q343.12;R969.1;Q55
96
2006-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）