海带（Laminaria）养殖品种遗传多样性的RAPD分析
本研究以四个海带(Laminaria)养殖群体为研究对象，采用RAPD分子标记技术对四个群体的遗传结构进行了研究，分析了各群体内的遗传变异、遗传多样性，以及四个群体间的遗传分化。主要结果如下：
对分别用SDS法、常规CTAB法、改良CTAB法三种方法提取的海带基因组DNA，进行紫外吸收检测、电泳检测和RAPD扩增检测。结果表明除SDS法外，其余两种方法均可获得完整的海带基因组DNA，RAPD扩增谱带清晰稳定。尤以改良CTAB法提取的DNA质量较好。
对海带RAPD-PCR条件进行了优化。优化条件为：(1)每一反应体系总体积25μL，含2.5μL10×buffer，40ngDNA模板，0.25μM引物，2.5mMMgCI2，0.2mMdNTP，1UTaq酶；(2)扩增程序：94℃，5min→[94℃，1min→37℃，1min→72℃，2min]×40→72℃，10min。
17个RAPD随机引物对每个群体各20个海带样本的基因组DNA进行了扩增，共获得136个重复性好且谱带清晰的RAPD标记，片断大小在0.2-1.5kb之间，四个群体的多态位点比例在39.71％-50.00％之间，Nei基因多样性指数在0.1728-0.2312之间，Shanoon多样性指数在0.2481-0.3270之间。其中对照群体遗传多样性水平最高，本牛群体、荣福群体次之，而福建群体最低。总体上，群体内个体间遗传差异明显，四个群体的遗传多样性水平较高。利用Shannon多样性指数和Nei多样性指数估算群体遗传变异的来源，Shannon多样性指数表明这四个海带养殖群体的遗传变异有83.01％存在于群体内；Nei指数统计的海带养殖群体间遗传分化为0.1218，说明海带养殖群体的遗传变异有12.18％存在于群体间。两者结论指出群体间存在一定程度的分化。AMOVA的分析结果表明，群体间属于中等分化水平。
本实验结果表明RAPD技术是一种简便有效的辅助育种的标记方法，对人工选育具有良好的指导性作用。
海带;RAPD;遗传多样性;海水养殖
中国海洋大学
硕士
水产养殖
宫庆礼
2005
中文
S968.42
66
2006-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）