虫草棒束孢（Isaria farinosa）多糖的研究
本文从液体深层发酵产多糖条件的筛选、胞内及胞外多糖的制备与分析和多糖的生物学活性三方面对IsariafarinosaB05菌株进行了研究。
(1)液体深层发酵产多糖条件中，由单因素实验和正交实验确定了IsariafarinosaB05菌株发酵最佳的培养基组成为：蔗糖3.5％(w/v)、蛋白胨0.5％、酵母臂0.2％、K2HPO40.1％、MgSO40.05％；由单因素实验确定了该菌株最佳的发酵条件为：初始pH7.0、温度25℃、装液量75mL/250mL、接种量5％(v/v)、培养时间5d；在最佳的培养基和培养条件下，该菌株最大的生物量达2.12g/100mL，产水溶性胞外多糖可高达2.14g/L。
(2)确定了胞外多糖的最佳提取工艺为发酵液在70℃下浓缩至原来的1/7，然后调pH7.0，加入3倍乙醇沉淀多糖；胞内多糖的最佳提取工艺为干菌体加30倍的水，100℃浸提150min，浸提2次。根据确定的工艺从IsariafarinosaB05菌株液体发酵获得的菌丝体及发酵液中提取得到水溶性胞内多糖(IPS)和胞外多糖(EPS)。
IPS和EPS经Q-SepharoseFF阴离子交换柱层析和SephacrylS-300HR凝胶柱层析分离得到主峰IPS1和EPS1。经SephacrylS-300HR凝胶柱层析证明纯化后IPS1和EPS1均一性较好。IPS1分子量为42kDa；糖含量为90.3％，含甘露糖、半乳糖、葡萄糖，摩尔比为8.0：4.8：1.0；糖醛酸含量为8.00％，有氨基糖存在；蛋白含量7.15％，含有11种常见氨基酸。EPS1分子量为208kDa；糖含量为93.4％，含甘露糖、半乳糖和少量葡萄糖，摩尔比为21.6：4.7：1.0；糖醛酸含量为8.06％，有氨基糖存在，蛋白含量4.38％，含有13种常见氨基酸。通过稀碱法确定IPS1和EPS1的糖肽键为N-糖苷键，红外光谱显示，二者为β-吡喃糖。
(3)研究了多糖的生物学活性。IPS1与EPS1对S180实体瘤有明显的抑制作用，IPS1的剂量为200mg/kg时，抑瘤率最大，为61.63％；EPS1的剂量400mg/kg时最大，为63.10％。IPS1和EPS1可以明显促进荷瘤小鼠抗氧化酶的活性，在抗肿瘤活性最高的剂量组中，SOD和CAT酶活普遍较高。进一步研究了虫草棒束孢多糖的体外抗氧化活性，发现IPS1具有清除·OH、O2-和H2O2和螯合Fe2+的作用，有强的还原力，可抑制脂质过氧化；而EPS1可清除O2-和H2O2，有强的还原力，可抑制脂质过氧化，但不能清除.OH和螯合Fe2+。
本文为虫草棒束孢多糖的工业化生产和临床应用奠定了一定的理论基础。
虫草棒束孢;多糖;发酵;分离提取;组分分析;生物活性
中国海洋大学
硕士
食品科学
江晓路
2005
中文
Q936;Q538
88
2006-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）