对虾白斑综合症病毒（WSSV）细胞膜受体及高分子量蛋白的初步研究

王向东

中国海洋大学

摘要：

通过蔗糖密度梯度离心从患病凡纳滨对虾头胸部组织中提取了WSSV,通过差速离心分离纯化了凡纳滨对虾鳃细胞膜.经ELISA验证,WSSV与提取的鳃细胞膜存在特异性、可饱和的结合,这符合病毒-受体结合的基本特征.可以初步判定WSSV与鳃细胞膜的结合,其实质是WSSV受体粘附蛋白与细胞膜上WSSV受体之间的结合.SDS-PAGE以后的凡纳滨对虾鳃细胞膜转印至NC膜上,然后与地高辛标记的WSSV孵育,通过抗体和显色系统寻找能与WSSV发生结合的细胞膜蛋白.该实验中没有发现能与WSSV发生结合的细胞膜蛋白,这可能是由于SDS-PAGE和转印过程中细胞膜蛋白发生了变性,而这种变性异致了受体蛋白的失活.由此可以初步判断WSSV受体蛋白可能是一个较复杂的蛋白或者蛋白复合体.SDS-PAGE以后的WSSV转印至NC膜上,然后与地高辛标记的凡纳滨对虾鳃细胞膜孵育,通过抗体和显色系统寻找能与细胞膜发生结合的WSSV蛋白.该实验在该实验室以前的工作中已经做过,并得到了VP37、VP39和两个高分子量蛋白四个可能的WSSV受体粘附蛋白,该文重复并验证了以前的实验.

关键词：对虾白斑综合症病毒;凡纳滨对虾鳃细胞膜;病毒受体;质谱

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：水产养殖

导师姓名：黄倢;战文斌

学位年度：2004

语种：中文

分类号：S945.1

页数：86

在线出版日期：2005-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）