高产琼胶酶菌株的选育和产酶的研究

汤海青

中国海洋大学

摘要：

该文从青岛沿海的红藻中筛选获得一株琼胶酶高产菌株AT-22,经鉴定属于假单胞菌属(Pseudomonas),暂命名为Pseudomonas sp.Strain AT-22.该菌的生长温度范围为20~40℃,生长的pH范围为5.0~9.0,该菌的生长不需要海水或NaCl,但2.0~40﹪的NaCl对其生长有利.对于琼胶、褐藻胶和演粉均具有降解作用,而对纤维素、几丁质、卡拉胶和木聚糖等无作用.通过此外诱变和化学诱变提高了菌株Pseudomonas sp.AT-22的产酶性能.进一步通过对Pseudomonas sp.AT-22发酵条件的研究,确定最佳产酶发酵培养基组成为:琼胶底物浓度0.3﹪、硫酸铵0.5﹪、蛋白胨0.3﹪、氯化钠3.0﹪、磷酸二氢钾0.1﹪、氯化镁0.1﹪;最佳发酵条件为:发酵温度24℃、培养基pH7.0、300ml三角瓶中培养基装量100ml、接种量1﹪.在上述培养条件下,48h摇瓶中发酵液的最高酶活力达到800U/mL.该琼胶酶是一种诱导型的胞外酶,在琼胶发酵培养基中加入小分子糖,如半乳糖、葡萄糖以及琼胶的降解物时,AT-22优先利用小分子糖,生长旺盛,产酶受到抑制.其中,半乳糖和蔗糖对AT-22的产酶抑制作用较强.对其理化性质进行研究,该酶最适反应温度为40℃,最适反应pH为7.0,酶在50℃以上易失活,在pH6.0~7.0的范围内,有较好的稳定性.最适底物浓度1.0~1.2﹪.K<'+>和CSa<'2+>离子对酶促反应有促进作用,而Fe<'3+>、Mn<'2+>、Zn<'2+>、和Pb<'2+>等离子有不同程度的抑制作用.该酶的Km为0.53mg/mL.

关键词：琼胶降解菌;琼胶酶;酶学性质;诱变选育

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：水产品加工及贮藏工程

导师姓名：管斌

学位年度：2004

语种：中文

分类号：Q939.1;Q55

页数：65

在线出版日期：2005-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）