大菱鲆（Scophthalmus maximus）病毒性出血病病毒基因克隆及序列分析

李向勇

中国海洋大学

摘要：

2002年,在山东省沿海的养殖大菱鲆中发生了一种出血性疾病,史成银等在病鱼组织切片中发现了虹彩病毒样粒子并怀疑该病为虹彩病毒引起的.我们在农业部海洋生物资源可持续利用重点开放实验室基金课题资助下,重点进行了病毒的基因文库的构建和部分序列分析的研究,建立了病毒的部分DNA文库,测定了病毒的部分序列并进行了序列的分析,同时我们还对病毒粒子进行了初步的SDS-PAGE电泳分析.利用已有的基因库中虹彩病毒的序列信息,根据比对的结果,选取了虹彩病毒基因组中的较为保守的区域作为模板,设计了多对针对虹彩病毒的PCR特异引物.这些引物没有从患病的大菱鲆提取的DNA中扩增出理论长度的片段.对扩增出的明显小于理论长度的PCR产物测序后,测得的序列在Genbank中进行多序列比对,没有发现明显同源的序列.表明患病鱼体内存在的病毒同基因库中存在的虹彩病毒序列间有差异.利用差速离心和蔗糖密度梯度离心的方法提取了病鱼组织中的病毒.酚抽提法提取了病毒提取物中的核酸,酶切分析表明病毒的遗传物质是双链DNA.

关键词：出血病;大菱鲆;虹彩病毒;基因文库;序列分析

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：海洋生物学

导师姓名：黄倢;张士璀

学位年度：2004

语种：中文

分类号：S941.4

页数：86

在线出版日期：2005-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）