海洋微生物低温碱性脂肪酶研究

邵铁娟

中国海洋大学

摘要：

海洋低温碱性脂肪酶(Marine Low-temperature Alkaline Lipase,MLAL)是由一适冷性海洋酵母Bohaisea-9145分泌的胞外酶.该论文主要进行了海洋低温碱性脂肪酶产生菌的鉴定、遗传育种、酶学性质、产酶条件优化、发酵动力学研究以及运用人工神经网络对菌株的发酵过程进行了模拟.采用正交实验、均匀设计等方法,在摇瓶条件下对海洋菌株Bohaisea-9145的碳源、氮源、诱导剂、碳氮比、培养温度、pH、装样量、接种量、种龄等产酶条件进行了筛选和优化等.菌株产酶周期短,生产成本低.筛选到的最适培养基的组成为豆饼粉4﹪,米糠4﹪,花生粕4﹪,粗制花生油0.5﹪,MgSO<,4> 0.05﹪,KH<,2>PO<,4> 0.2﹪,pH5.0.菌株产酶的最适温度为26±1℃,溶氧需求高.经各种条件优化以后,酶活由原来的57.4μ/ml提高到258.67μ/ml,比优化前水平提高了四倍多.利用20L-NLF22型自动控制发酵罐,我们对菌株的发酵动力学进行了研究.经批式发酵发现Bohaisea-9145的细胞生长比较典型,各个期段比较分明,发酵类型属于部分生长产物合成偶联型.根据先验公式,利用批式发酵数据来构建人工神经网络,对菌株的补料批式发酵过程进行了模拟.实验证明,混合神经网络在优化补料速率策略方面是有效的,提高了产酶量的同时大大节约了生产成本,在发酵工艺当中具有广泛的应用前景.该结果具有一定的创新性,填补了国内在海洋低温碱性脂肪酶研究领域的一些空白,对加速开发中国海洋微生物资源的利用及其产业化具有重要的理论和实际意义.

关键词：海洋低温碱性脂肪酶;分类鉴定;酶学性质;产酶条件;发酵动力学

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：海洋生物

导师姓名：郑家声;孙谧

学位年度：2004

语种：中文

分类号：Q55

页数：72

在线出版日期：2005-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）