大菱鲆病原菌的鉴定及哈维氏弧菌溶血素的克隆

颜显辉

中国海洋大学

摘要：

从病大菱鲆中分离到九株菌VA-1、VA-2、VA-3、VH-1、VI-1、ET-1、EN-1、MA-1和PA-1.经形态及生理生化鉴定,VA-1、VA-2、VA-3为鳗弧菌,VH-1为哈维氏弧菌,VI-1为肠弧菌,ET-1为迟缓爱德华氏菌,EN-1属于肠球菌属,MA-1属于海单胞菌属,PA-1属于交替单胞菌属.对九株菌的16SrDNA序列进行了扩增、克隆、测序和序列分析.序列分析结果显示,VA-1、VA-2、VA-3和鳗弧菌O1和O2a血清型亲缘关系最近;VH-1和哈维氏弧菌的亲缘关系最近;VI-1和肠弧菌的亲缘关系最近;ET-1和迟缓爱德华氏菌的亲缘关系最近;EN-1与肠球菌亲缘关系最近;PA-1与假交替单胞菌亲缘关系最近;而MA-1与海单胞菌亲缘关系较远.综合考虑形态及生理生化特征和16SrDNA序列分析结果,可以判定VA-1、VA-2、VA-3为鳗弧菌,VH-1为哈维氏弧菌,VI-1为肠弧菌,ET-1为迟缓爱德华氏菌,EN-1属于肠球菌属,PA-1属于假交替单胞菌属,而MA-1还需进一步鉴定.应用PCR扩增,从哈维氏弧菌VH-1染色体DNA扩出哈维氏弧菌溶血素基因片断,DNA序列分析表明:克隆的片断由1257个碱基组成,含有完整的溶血素基因阅读框.其核苷酸序列与哈维氏弧菌VIB 645的两种溶血素vhhA和vhhB的同源性分别为99.7﹪和98.4﹪;与副溶血弧菌、霍氏弧菌、鳗弧菌、霍乱弧菌、河流弧菌、最小弧菌、创伤弧菌溶血素的相似性分别为74.6﹪、24.6﹪、20.1﹪、22.5﹪、20.8﹪、20.5﹪、21.7﹪.

关键词：大菱鲆;病原菌;鉴定;16SrDNA;哈维氏弧菌;溶血素

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：海洋生物学

导师姓名：李筠;陈吉祥

学位年度：2004

语种：中文

分类号：S941.4

页数：69

在线出版日期：2005-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）