白斑综合症病毒（WSSV）的PCR检测条件优化及浮游动物中间宿主的调查研究

闫冬春

中国海洋大学

摘要：

该研究采用灵敏、可靠的检测技术,结合具体的养殖实践,调查了WSSV在池塘养殖系统中的分布情况,并对池塘底泥中的轮虫休眠卵在传播WSSV中的作用和机制进行了初步研究,以期为今后有效杀灭WSSV提供理论依据.该文所得主要结果如下:设计了2对引物用于检测对虾白斑综合症病毒(WSSV),外引物用于PCR扩增,内引物用于合成探针进行斑点杂交.于2002年采用PCR-核酸探针斑点杂交法检测了乳山对虾养殖场1000余份样品携带白斑综合症病毒(WSSV)的情况.采用PCR-核酸探针斑点杂交法检测了对虾养殖池塘底泥中轮虫休眠卵及孵出轮虫携带WSSV的情况.表面消毒后的检测结果表明,WSSV极有可能存在于休眠卵的内部,轮虫休眠卵在对虾养殖池塘隔冬传播WSSV中可能起着重要作用.对采于海水养殖池塘的壶状臂尾轮虫休眠卵及孵出轮虫进行了电镜观察.结果表明,轮虫休眠卵表面有明显的、不规则的褶皱突起,且附着一些污染物.轮虫细胞内线粒线、内质网密集.WSSV浸浴攻毒后轮虫出现细胞核及核仁膨大.初步研究了池塘轮虫休眠卵及其孵出轮虫传播白斑综合症病毒(WSSV)的可能性.以轮虫及其休眠卵粗提液注射淡水克氏原螯虾,结果注射轮虫休眠卵粗提液组未出现阳性,注射轮虫粗提液组出现1例阳性,表明轮虫有可能传播WSSV.

关键词：白斑综合症病毒;PCR-核酸探针斑点杂交;围栏养殖;轮虫休眠卵;传播途径

授予单位：中国海洋大学

授予学位：博士

学科专业：水产养殖

导师姓名：董双林;黄倢

学位年度：2004

语种：中文

分类号：S945.46;S945.19

页数：134

在线出版日期：2005-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）