海带配子体克隆培养技术研究
该文主要探讨了海带配子体克隆的大规模培养条件,对海带配子体克隆生长的适宜温度、光照时间、光照强度、营养盐消耗、培养状态以及接种密度进行了研究,并在相对适宜条件下进行了大规模培养实验,同时,对海带配子体克隆在培养过程中的生长规律进行了研究.以期为克隆的生长性培养提供理论依据和技术支持,为海带育苗方式从传统的夏苗培育法向配子体克隆育苗转化提供前提条件,研究结果表明:温度是影响海带配子体克隆生长最重要的环境因子之一,在10-15℃范围内,配子体克隆的生长速度最快,在25℃条件下,实验中所用的海带配子体克隆几乎不能存活,在相同温度、光照、营养盐等条件下,细胞数基本相同的雌、雄配子体克隆的生长速度相近.光照对海带配子体克隆的生长起着至关重要的作用,光照时间和光照强度直接影响着克隆细胞的生长.在光周期为24h/d,光照强度为1500-2500Lux条件下,克隆细胞具有最快的生长速度.通过对不同密度克隆对营养盐的消耗研究,表明当克隆的密度较小时,N6ppm、P1ppm、每周换水一次,可满足其生长需要;克隆密度较大时,N10ppm、P2ppm、每周换水一次,可满足其生长需要.在充气悬浮培养条件下克隆的瞬时生长率明显高于静置培养.因此,充气悬浮培养具有较高的培养效率,适宜于进行生产性培养.在不同接种密度下,克隆的生长速度不同,实验结果表明:分瓶数量越多,克隆总重量增长越多.接种密度越低,克隆的生长速度越快.在生产条件许可的情况下,适当多分瓶,可提高克隆总产量.克隆在培养过程中其生长规律为:在培养初期,克隆密度较小时,其瞬时生长率逐渐增大;随着培养时间延长,克隆密度增加,生长速率逐渐下降.因此,应及时分瓶,以保证较快的生长速度.在20L广口瓶中,接种密度0.5g/L,提供适宜的生长条件,进行了五个重复组的克隆生长试验,取平均值做出鲜重增长曲线,通过回归分析得y=-0.1118+1.3108x+0.085x<'2>-0.0006x<'3>(P2=0.9985),该公式可用于估算克隆生产量(其中y是鲜重,x是天数).大规模培养结果表明在20L广口瓶中(有效水体15L),48g克隆在起始培养时经组织捣碎机粉碎切割,切割时间10s(细胞段长度约200um),并按0.35g/L接种,一个月后不粉碎直接分瓶,分瓶密度1.5g/L,一个月后最大密度410g/瓶,生长速度约每周翻一番.据此推算,一个年生产能力4亿株(中等规模)的育苗场采苗所需克隆量为36kg,只需在100个左右20L的培养瓶中,经2个月左右的时间就能生产出来.可见克隆育苗生产所需的克隆在室内器皿中人工培养是完全可行的.
海带;配子体克隆;培养条件;大规模培养;生长规律
中国海洋大学
硕士
海洋生物学
唐学玺
2003
中文
S968.421
25
2004-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）