海洋假别单胞菌CY24的琼胶酶基因的克隆、重组表达及酶学性质研究

褚艳

中国海洋大学

摘要：

该论文利用琼胶作为唯一碳源的选择性培养法从海水中分离得到1株高产琼胶酶的菌株,通过形态观察、生理生化实验以及16SrDNA序列分析,鉴定该菌株属于假别单胞菌属(Pseudoalteromonas),命名为假别单胞菌Pseudoalteromonassp.)CY24.经发酵条件优化确定最适培养基配方为(w/v):NaCl 2.5﹪、干酪素0.25﹪、MgSO<,4>·7H<,2>O0.5﹪、KCL0.1﹪、FeSO<,4>·7H<,2>O0.002﹪、CaCl<,2>0.02﹪、NaH<,2>PO<,4>0.06﹪、琼胶0.25﹪、pH7.0.最佳培养条件为25℃培养24h,优化后粗酶液的酶活最高可达1.8U/ml,较优化前提高了20倍.本论文利用现代分子生物学的最新技术,从海洋假别单胞菌CY24中克隆并重组表达了一种新的琼胶酶基因,酶学性质研究表明该酶具有高活力和高底物专一性,为高纯度琼胶寡糖的大量制备创造了条件,为琼胶寡糖的基础和应用研究提供技术支撑,满足人类日益增长的需求.为海洋寡糖类创新药物的研究开发以及相关产业的发展奠定新的技术方法学基础,对推动糖生物学和化学研究的深入开展具有重要意义.

关键词：假别单胞菌;琼胶酶;基因克隆;重组表达;琼胶寡糖

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：生药学

导师姓名：于文功

学位年度：2003

语种：中文

分类号：R282.77

页数：59

在线出版日期：2004-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）