对虾白斑综合症病毒（WSSV）囊膜蛋白VP28与对虾鳃细胞膜蛋白的分离和结合活性分析

解飞霞

中国海洋大学

摘要：

使用差速离心、蔗糖垫和蔗糖密度梯度离心法,从人工感染白斑综合症病毒(White spot syndrome virus,WSSV)的克氏原螯虾中提取WSSV,Bradford法测定病毒浓度为0.912mg/ml.分别取1ml的病毒悬液,用两种离子型表面活性剂SDS(十二烷基硫酸钠)和脱氧胆酸钠,及两种非离子型表面活性剂Triton X-100和Tween-20室温处理30min后,经不连续蔗糖梯度(40﹪-52﹪)离心和SDS-PAGE显示,确定这四种表面活性剂都可以增溶病毒囊膜的蛋白VP28.当病毒浓度为0.912mg/ml时,SDS、脱氧胆酸钠、Triton X-100和Tween-20增溶WSSV囊膜蛋白VP28的最佳浓度(v/v)分别为0.5﹪、1﹪、1﹪、1.5﹪.以健康对虾的鳃组织为材料,经过差速离心后获得对虾鳃细胞膜.测定蛋白浓度后,用地高辛进行标记,并测得标记后的产量为300pg/μL;SDS-PAGE得出对虾鳃细胞膜的多肽图谱;并与对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)进行体外结合实验,确定标记后的对虾鳃细胞膜具有结合活性.

关键词：囊膜蛋白VP28;结合活性分析;细胞膜蛋白;蛋白分离;对虾;白斑综合症病毒;鳃细胞膜;肝素钠

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：海洋生物

导师姓名：徐怀恕;黄倢

学位年度：2003

语种：中文

分类号：S945.46

页数：72

在线出版日期：2004-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）