浮游细菌遗传多样性分析的T-RFLP方法研究

柳承璋

中国海洋大学

摘要：

该论文对近年来在国外微生物遗传多样性研究中发展迅速的T-RFLP方法进行探索,目的在于掌握其原理、方法和应用,以及优缺点,以便应用到微生物分子生态这的研究中去.该研究将T-RFLP方法应用于现场采样、液体和平板培养的细菌.对方法中各个步骤,包括DNA提取与纯化、PCR引物的选择和反应条件的确定、限制性酶切和产物的纯化,以及最终酶切片段的分离和检测进行了摸索.研究结果表明:DNA提取和PCR的空白试验表明,本方法容易受到污染的影响,对实验材料和无菌操作的要求必须严格.从平板培养样品的T-RFLP图谱判断它们属于至少3种不同的类群;湖水样品0.2μm膜样图谱表明湖水中自由的生活细菌至少包括22个不同的类群.湖水中吸附于颗粒的细菌至少有4个类群.自由生活和吸附于颗粒的细菌类群组成存在显著的差别.

关键词：细菌;遗传多样性;T-RFLP

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：海洋生物学

导师姓名：杨官品;焦念志

学位年度：2003

语种：中文

分类号：Q93-33

页数：46

在线出版日期：2004-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）