文昌鱼分子生物学：AmphiHMGB、AmphiUbf80和AmphiPrxV基因克隆、表达与进化研究

刘振辉

中国海洋大学

摘要：

该文应用SMART<'TM>cDNA Library Construction Kit的方法,以成体文昌鱼肠为研究材料,构建了以真核表达载体pcDNA3O为基础的cDNA表达文库.对文库克隆进行序列测定和生物信息学分析,已经获得了54个克隆,代表了文昌鱼至少39个不同的基因.有14个克隆包含有完整的开放阅读框,其中包括抗氧化物酶基因Prx、DNA结合蛋白基因、泛素基因、信号识别蛋白基因、溶菌酶基因和乙酰基转移酶基因等具有重要生物学功能的基因.文昌鱼肠cDNA表达文库的成功构建,为从分子生物学水平研究文昌鱼的进化与发育奠定了基础,也是分离新基因的重要来源.通过Northern blot、Dot blot和原位杂交等技术,研究了文昌鱼AmphiHMGB基因的表达图式.Northern blot和Dot blot杂交显示该基因在成体不同组织中表达差异性很大:卵巢表达最强,肠次之,而在肌肉、脊索和精巢中未检测到杂交信号;在胚胎发育的不同时期表达也存在差异;卵裂期、囊胚期和原肠胚期表达较强,而在神经胚期和1天幼虫期表达减弱.原位杂交分析表明从受精卵到神经胚,AmphiHMGB基因广泛表达,但随着发育的进行,中胚层、内胚层和神经管的表达减弱,到1天幼虫期,仅在表皮可检测到表达.AmphiHMGB转录子在胚胎发育早期的丰富存在表明AmphiHMGB可能在文昌鱼胚胎的有丝分裂中发挥重要的作用.

关键词：青岛文昌鱼;AmphiHMGB;AmphiUbf80;AmphiPrxV;基因克隆;系统进化分析;表达图式

授予单位：中国海洋大学

授予学位：博士

学科专业：海洋生物学

导师姓名：张士璀

学位年度：2003

语种：中文

分类号：Q959.287

页数：160

在线出版日期：2004-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）