太平洋磷虾磷脂提取及磷脂酰胆碱的分离纯化研究
海洋生物是磷脂的优质来源，且含有大量的多不饱和脂肪酸(PUFA)，尤其是EPA(二十碳五烯酸)、DHA(二十二碳六烯酸)等n-3系列多不饱和脂肪酸(n-3PUFA，也称ω-3系列多不饱和脂肪酸、ω-3 PUFA)，这使得在海洋生物机体内形成了含有独特脂肪酸成分的磷脂，即DHA/EPA磷脂。DHA/EPA磷脂(尤其DHA/EPA-PC)除具有磷脂及不饱和脂肪酸(DHA、EPA)的双重生理功能外，还因其结构为特殊脂肪酸与磷脂分子骨架的结合，而具有诸多独特生理功能，例如:保护视力、提高学习能力、防治心血管疾病、抗癌、增加细胞膜流动性等。因此，DHA/EPA磷脂在医药保健方面具有极大的开发利用价值。 但目前市面上磷脂主要分为大豆磷脂和卵黄磷脂两种。而对富含DHA、EPA的海洋源磷脂的研究相对较少，尤其是对海洋源磷脂酰胆碱的研究鲜见报道。 本研究以山东半岛海域优势虾种太平洋磷虾为原料，以建立适宜工业生产的低成本、高效、绿色太平洋磷虾磷脂和太平洋磷虾PC的提取及分离纯化工艺为目标，首先开展太平洋磷虾磷脂的提取纯化工艺研究，然后以得到的太平洋磷虾磷脂为原料，进行太平洋磷虾PC的分离纯化工艺研究并进行工艺优化。具体研究内容及结果如下: 首先，以太平洋磷虾粉为原料，以产物太平洋磷虾磷脂纯度及回收率为指标，对各项影响因素进行单因素试验及正交试验，优化乙醇提取太平洋磷虾粗磷脂的工艺条件。最终确定最佳实验条件为:先乙醇提取后有机溶剂脱中性脂为实验工艺流程，提取溶剂为95％乙醇、液固比5∶1、提取温度40℃、提取时间3h、摇床辅助混合、提取次数2次。在最优提取条件下，所制粗磷脂产品中太平洋磷虾磷脂回收率为90.13％，纯度为28.65％。 其次，以最优条件下制得的太平洋磷虾粗磷脂为原料，以产物太平洋磷虾磷脂纯度及回收率为指标，对脱中性脂工艺中各因素进行了优化，最优脱中性脂工艺条件为:以丙酮为脱中性脂试剂，液固比10∶1，超声时间25min，超声功率250w，超声温度40℃，脱中性脂次数2次。最优条件下所得产品中太平洋磷虾磷脂回收率为89.26％，纯度由28.65％提高至52.93％。采用薄层层析扫描法，分析太平洋磷虾磷脂主要组分及其含量，其中太平洋磷虾PC含量为49.68％，另有5.32％PE及较多SM、LPC。以太平洋磷虾磷脂作为原料，用柱层析法对其进行进一步分离纯化。 第三，以自制太平洋磷虾磷脂为原料，以产物太平洋磷虾PC纯度及回收率为指标，优化柱层析实验条件。最终选择溶剂用量小，谱带重叠度低的中性氧化铝作为分离纯化太平洋磷虾PC柱层析实验的固定相，最优柱层析条件为:层析柱径高为D25×300mm，固定相为100～200目中性氧化铝，流动相为95％乙醇，上载量为0.3g/g氧化铝，洗脱速度为3mL/min。在此条件下纯化产物太平洋磷虾PC回收率达到65.33％，纯度达到94.29％。 最后，对太平洋磷虾PC进行主要理化指标及脂肪酸组分进行测定，太平洋磷虾PC中含有丰富的不饱和脂肪酸，其中DHA+EPA含量达到总脂肪酸的30％以上。对太平洋磷虾PC在贮存过程中不同温度、光照、空气接触情况对其氧化稳定性的影响进行探讨。研究结果显示，低温、避光、隔绝空气有助于提升太平洋磷虾PC在贮藏过程中的氧化稳定性，其中低温及隔绝空气效果较避光更为显著。
磷虾磷脂;提取工艺;磷脂酰胆碱;分离纯化
中国海洋大学
硕士
食品加工与安全
韩玉谦
2015
中文
R282.74;R284.2
83
2016-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）