暗纹东方鲀大规模家系构建及两种东方鲀卵质评估
暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)、红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)均为东方鲀属(Takfugu)，为国内重要的养殖型经济鱼类，但暗纹东方鲀家系构建的早期标准化培育方法尚未建立，且作为影响其家系构建早期培育阶段成败的重要因素，暗纹东方鲀、红鳍东方鲀卵子的质量评估标准也亦未建立。为创建暗纹东方鲀家系的早期标准化培育方法，研究暗纹东方鲀卵子可发育能力与其生化指标的关系，探究红鳍东方鲀卵子生理生化变化及对其卵质影响，找出本文做了三部分工作，简要如下: 1.暗纹东方鲀家系构建与早期标准化培育 采用人工授精和家系构建技术，对暗纹东方鲀全同胞家系构建与标准化培育技术进行探索。按照1雄配1雌的原则，选取广州、江苏和上海3个群体的暗纹东方鲀亲鱼进行育熟与定向交配，并对暗纹东方鲀早期生长阶段子稚鱼进行了环境标准化和一、二、三、四级数量标准化培育。结果显示，在受精及孵化阶段，暗纹东方鲀亲鱼总体产卵量大，多集中在250-350g，但有5个家系产卵量不足200g，将其淘汰;家系间初孵仔鱼数在0.5-14万尾不等，家系间差异较大，有6个家系因初孵仔鱼数低于5万而被淘汰。从4次数量标准化结果看，一级数量标准化后，有66个家系存活率不低于80％，且仅有1个家系成活率不足50％而遭淘汰;二级数量标准化后，各家系存活率普遍高于70％，仅有3个家系存活率不足70％而被淘汰;三级数量标准化后，全部家系的稚鱼存活率均在70％以上，且在80％以下的仅有2个家系，并将其淘汰;四级数量标准化后，各家系幼鱼存活率均在80％以上，其中有42个家系存活率高于90％。由此可知，各阶段绝大多数家系的成活率保持在较高水平，4次数量标准化后，成功构建了82个全同胞家系。结果表明，暗纹东方鲀较大的产卵量对构建全同胞家系有利，人工授精前准备数量充足的亲鱼也尤为重要此外，在早期阶段家系构建和培育阶段，保持家系间同步性可较好降低家系间环境差异带来的影响。文章对暗纹东方鲀家系构建中的问题进行了探讨，可为大规模建立暗纹东方鲀家系提供一定借鉴。 2.暗纹东方鲀卵子磷酸酶等生化指标分析与卵质评估 用生化分析方法对暗纹东方鲀未受精卵子基本成分、磷酸酶活力、苹果酸脱氢酶活力、唾液酸、氨基酸含量进行分析，同时用GC-MS方法对脂肪酸组成及相对含量进行检测，并对各物质变化规律与其孵化率的相关性进行分析。结果显示，酸性磷酸酶活力、唾液酸含量与孵化率显著相关(P＜0.05，R12=0.501，R22=0.406)，碱性磷酸酶与孵化率显著负相关(P＜0.05，R2=0.690);C14∶0与孵化率显著相关(P＜0.05，R2=0.684)，并呈现递减趋势;ARA、DHA与孵化率均显著相关(P＜0.05，R12=0.447，R22=0.710)，并呈现先递增后递减的变化趋势;n-3脂肪酸、DHA与EPA之比均与孵化率存在显著相关(P＜0.05，R12=0.509，R22=0.722，R32=0.550)。结果表明，磷酸酶、唾液酸、脂肪酸等物质变化规律与卵子孵化率存在相关性，且ACP活力值在[68.045，141.038]范围时，AKP活力值在[2.298，7.241]范围时，SA含量在[9.081，19.973]范围时，C14∶0含量在[0.485，0.658]范围时，ARA含量在[1.371，2.498]范围时，DHA含量在[13.838，18.469]范围时，均可作为卵子孵化率不低于50％的参考指标，据此可在一定程度上反应出暗纹东方鲀苗种繁育生产中所用卵子的可孵化价值，亦可作为参考指标对其卵子质量进行初步、客观评价。 3.红鳍东方鲀卵子生理生化分析与质量评估 人为对性成熟亲鱼各推迟一周、两周挤卵，并与正常组作比较，研究其推迟产卵后卵子内磷酸酶、苹果酸脱氢酶、脂肪酸等生化参数变化规律及其与受精率的相关性。结果显示，推迟一周产卵后，B卵子组受精率显著下降（P＜0.05），两周后，C组受精率降至31.89％;卵内酸性磷酸酶活力随产卵期推迟而显著下降(P＜0.05)，并与受精率存在显著正相关(R2=0.705，P＜0.05);正常排卵A组苹果酸脱氢酶活力显著高于B、C两组(P＜0.05)，总氨基酸含量亦存在相似变化趋势，A、B组显著高于C组(P＜0.05);此外C14∶0、C15∶0、C16∶0、C16∶ln-7、C18∶3n-3、C20∶5n-3在总脂中比例均在正常组中最高，并与受精率存在显著正相关(P＜0.05);C22∶5n-3、DHA∶EPA均与受精率呈显著负相关(P＜0.05)。结果表明，酸性磷酸酶、苹果酸脱氢酶、总氨基酸及多种脂肪酸可在一定程度反应红鳍东方鲀卵子过熟与否，亦可作为参考指标对其卵子质量进行初步评价。
暗纹东方鲀;家系构建;卵质评估;生化指标;发育能力
中国海洋大学
硕士
水产养殖
马爱军;温海深
2015
中文
S965.333
80
2016-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）