鼠尾藻和海带多糖与多酚对黄嘌呤氧化酶抑制作用及对高尿酸血症小鼠降尿酸效果研究
黄嘌呤氧化酶(EC1.1.3.2.2，Xathine Oxidase，XOD)是机体尿酸代谢的关键酶，在机体内能够将次黄嘌呤氧化为黄嘌呤并且继续氧化生成终产物尿酸、过氧化氢和超氧化物。人体内尿酸含量过高会引发高尿酸血症并最终导致痛风，持续性的高尿酸血症会引起高血压、高血脂、心血管疾病、慢性肾病等并发症的发生。近年来，黄嘌呤氧化酶抑制剂作为一种极为有效的抗高尿酸血症药物受到了国内外研究学者的广泛关注。但是，目前临床中应用的黄嘌呤氧化酶抑制剂类药物普遍存在着严重的毒副作用，因此，从天然活性物质中寻找高效、安全无毒的黄嘌呤氧化酶抑制剂逐渐成为抗高尿酸血症药物研究的新方向。 本文研究了鼠尾藻和海带多糖与多酚对XOD的抑制作用，测定了它们在体外对XOD的半抑制浓度(IC50);动力学方法研究了这些多糖与多酚对XOD的抑制类型、抑制机理和抑制常数;分别测定了它们与别嘌呤醇的联合抑制作用以及在体外对自曲基的清除作用;采用氧嗪酸钾腹腔注射小鼠建立高尿酸血症模型，研究了海带多糖对高尿酸血症小鼠的降尿酸效果，并对小鼠肝脏中XOD的活力进行测定。实验结果如下: 实验测得鼠尾藻多酚与鼠尾藻多糖对XOD都具有一定的抑制作用，其IC50分别为0.58mg/mL和1.21mg/mL，动力学分析结果显示，二者对XOD的抑制类型都为竞争性可逆抑制作用，Ki值分别为0.07mg/mL和0.46mg/mL;海带多酚与海带多糖的IC50分别为0.88mg/mL和1.63mg/mL，海带多糖对XOD的抑制类型为竞争性可逆抑制作用，Ki值为0.30mg/mL，海带多酚对XOD的抑制类型为反竞争性可逆抑制作用，Ki值为0.21 mg/mL。用等毒法研究这些海藻多糖和多酚与别嘌呤醇的联合抑制作用，结果显示鼠尾藻多酚与别嘌呤醇的联合抑制作用属于弱协同作用;鼠尾藻多糖、海带多酚、海带多糖与别嘌呤醇的联合抑制作用都表现为协同作用。 鼠尾藻和海带多糖与多酚在体外对OH-和O2-都具有清除作用，其中鼠尾藻多糖和鼠尾藻多酚对OH-的清除率都大于50％，并且随着清除剂浓度的增大，清除率也随之升高，二者对O2-的清除作用较弱，最高清除率为61.86％，剂量依赖关系不显著。海带多糖和海带多酚对OH-的清除作用更强，清除率最高可达到92.13％，剂量依赖效应显著，而对O2-的清除作用较弱，剂量依赖效应不显著。 用不同剂量的海带多糖灌胃7d后，海带多糖高、中剂量组小鼠血尿酸水平明显低于模型组(P＜0.05)，小鼠肝脏中XOD的酶活力与模型组相比差异显著(P＜0.05)，说明海带多糖能够显著降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平，且对小鼠肝脏中XOD酶活具有抑制作用。实验组小鼠的血尿酸水平与正常组小鼠相比无明显差别(P＞0.05)，说明高尿酸血症小鼠的血尿酸已基本恢复至正常水平。此外，海带多糖组小鼠在实验期间体重增长稳定、毛色鲜亮、精神状态良好、无死亡现象，证明海带多糖作为降尿酸药物是安全无毒的。 鼠尾藻和海带多糖与多酚对XOD具有较高的抑制活性，在体外对羟自由基和过氧阴离子都具有较强的清除作用，且海带多糖对氧嗪酸钾所致的高尿酸血症具有良好的改善作用。海带是一种食用藻类，其营养丰富，安全无毒，具有多种生物活性功能，鼠尾藻作为沿海常见的优势种海藻，全年生长，分布广泛，目前还未得到充分的开发利用。因此，鼠尾藻和海带多糖与多酚在作为抗高尿酸血症药物和抗氧化剂方面都具有良好的开发前景，本文为鼠尾藻和海带的进一步开发与应用提供了新的研究思路。
高尿酸血症;鼠尾藻;海带多糖;多酚;黄嘌呤氧化酶;降尿酸效果
中国海洋大学
硕士
生物化学与分子生物学
焉翠蔚
2015
中文
R589.7;R282.71
75
2016-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）