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目录
第一章引言
1．1 鱼类免疫系统
1．1．1 鱼类免疫器官
1．1．2 鱼类免疫组织
1．1．3 鱼类体液免疫
1．2 母源免疫
1．2．1 母源免疫及传递机制
1．2．2 鱼类中特异性免疫因子母源传递研究现状
1．2．3 鱼类中非特应性免疫因子母源传递现象
1．2．4 亲鱼免疫对子代的作用及未来发展优势
1．3 大菱鲆繁殖期间精浆中氧化物和抗氧化物的含量变化及对精子质量的影响
1．4 大菱鲆繁殖期间精浆中免疫因子含量变化及对精子质量的影响
第二章亲鱼免疫及后代抗菌能力检测
1 实验内容与方法
1．1 亲鱼准备与免疫
1．2 配子采集，受精及胚胎培育
1．3 胚胎攻读实验
1．4 幼仔鱼攻毒实验
1．5 后代匀浆与鳗弧菌共培养实验
1．6 数据处理
2 实验结果
2．1 亲鱼免疫效力检测
2．2 胚胎存活率
2．3 幼仔鱼存活率分析
2．4 后代匀浆抗鳗弧菌效力检测
3 讨论
第三章后代免疫因子基因表达检测
1 实验内容与方法
1．1 提取RNA及RNA质量检测
1．2 琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量
1．3 RNA反转录
1．4 实时荧光定量PCR(Real-time PCR)
1．5 数据处理
2 实验结果
3 讨论
第四章免疫因子含量测定
1 实验内容与方法
1．1 IgM含量分析
1．2 白介素IL-1β含量分析
1．3 补体C3含量分析
1．4 转铁蛋白TRF含量分析
1．5 转化生长因子β1(TGF-β1)酶联免疫分析
1．6 溶菌酶含量测定
1．7 数据处理
2 实验结果
3 讨论
第五章大菱鲆不同繁殖期精子质量的变化
1 材料与方法
1．1 亲鱼培育与精液采集及精子匀浆处理
1．2 精子的CASA检测
1．3 精子密度统计
1．4 精子匀浆上清或精浆中蛋白含量测定
1．5 精子匀浆上清液和精浆中ATP含量测定
1．6 数据处理
2 实验结果
2．1 产精量变化
2．2 精子密度变化
2．3 精子活化率变化
2．4 精子运动特征的变化
2．5 大菱鲆精子中蛋白含量
2．6 大菱鲆精浆中蛋白含量
2．7 大菱鲆精子中ATP含量
3 讨论
第六章大菱鲆精液中氧化与抗氧化物的含量极其对精子质量的影响
1 材料与方法
1．1 材料准备
1．2 精液中VE测定
1．3 精液中谷胱甘肽还原酶(GR)测定
1．4 精液中VC测定
1．5 过氧化氢酶(CAT)活力测定
1．6 超氧化物歧化酶(SOD)活力测定
1．7 过氧化氢(H2O2)含量测定
1．8 羟基自由基含量(OH·)测定
1．9 氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测定
1．10 大菱鲆精子和精浆中尿酸含量测定
1．11 精液中氧化与抗氧化物和精子质量之间的相关性分析
2 实验结果
2．1 大菱鲆繁殖期不同时间精子和精浆中氧化物和抗氧化物的含量变化
2．2 大菱鲆繁殖期不同时间精子质量变化
2．3 氧化物及抗氧化物与精子质量相关性分析
3 讨论
第七章大菱鲆精液中的免疫因子及对精子质量的影响
1 材料与方法
1．1 亲鱼培育、精子采集及匀浆
1．2 IgM含量分析
1．3 白介素IL-1β含量分析
1．4 补体C3含量分析
1．5 转铁蛋白TRF含量分析
1．6 转化生长因子β1(TGF-β1)酶联免疫分析
1．7 溶菌酶含量测定
1．8 精浆蛋白水解酶活性测定
1．9 乳酸脱氢酶活性测定
2 实验结果
2．1 大菱鲆精浆中免疫因子含量变化
2．2 大菱鲆繁殖期精子质量变化
2．3 大菱鲆精浆中免疫因子与精子质量相关性分析
3 讨论
第八章前景与展望
参考文献
致谢
在学期间发表的学术论文