高品质海地瓜多糖制备工艺研究
海参是我国传统海产珍品，海参体壁富含多种生理活性物质，海参多糖是海参体壁的重要功效成分。目前海参多糖提取缺乏系统研究，传统工艺提取的多糖品质较差。海地瓜是我国大宗低值海参，其体壁多糖的提取及应用将为低值海参的高值化加工利用提供一种有效的途径。
选取低值海参海地瓜，提取其体壁中的海地瓜多糖。建立了海地瓜多糖质量评价体系。确定海地瓜多糖中蛋白含量测定方法，Folin-酚法可以准确简便的测定海地瓜多糖中蛋白含量。确定浊度检测方法，浊度检测波长为470nm。确定色值检测方法，色值检测波长为460nm。
采用酶解结合超滤技术制备海地瓜多糖，通过酶种类筛选、单因素实验及响应面实验，研究蛋白酶种类、酶解pH值、温度、底物浓度、酶底比及酶解时间对产物蛋白含量的影响，并探究制备低蛋白含量海地瓜多糖的最优条件，成功建立了以产物蛋白含量为响应值，以酶解温度、底物浓度及酶底比为自变量的数学模型。结合模型预测与时间优化，确定最佳酶解制备条件为酶解pH7.0、温度51℃、底物浓度4.82％、酶底比4.08％、酶解时间12h。在此条件下，产物蛋白含量为(2.41±0.24)％。
海地瓜的蛋白酶解液含有大量浑浊物，对海地瓜酶解液中浑浊物的性质展开研究。海地瓜酶解液中的浑浊物主要由蛋白质、脂质与灰分组成，表面电位为-46.3mV，平均粒径为597nm。浑浊物引起的浑浊主要由其中的蛋白与脂质导致，蛋白由疏水相互作用聚合而成。此外，海地瓜多糖色素含量较高，对多糖中色素性质进行研究。多糖中的色素主要为阴离子型。以海地瓜酶解液中浑浊物的性质为指导建立海地瓜酶解液除浊的理想方法。使用AG-800＃硅藻土进行过滤，除浊率为100％，处理后的海地瓜酶解液澄清透明。以色素性质为指导，采用大孔树脂对海地瓜多糖进行脱色处理，通过单因素及响应面实验成功建立了树脂D392对多糖脱色的数学模型，并确定最优工艺条件为时间5h，pH10，温度60℃。此时脱色率达到(84.2±0.6)％。
综合以上实验，采用复合蛋白酶，酶解制备条件为酶解pH7.0、温度51℃、底物浓度4.82％、酶底比4.08％、酶解时间12h。海地瓜酶解液经2500g离心后，再经AG-800＃硅藻土滤饼过滤。超滤三次，每次超滤浓缩至原体积的六分之一，加水补足，截留液冻干。采用树脂D392对多糖脱色，工艺条件为时间5h，pH10，温度60℃。多糖得率为4.2％，质量检测结果为蛋白含量2.1％，澄清，乳白色。
创新将双水相引入海参多糖分离纯化，利用双水相体系从海地瓜多糖中萃取分离硫酸软骨素和岩藻聚糖硫酸酯，对多糖在该体系中的分配行为进行研究。双水相优选体系为15％PEG10000，12.5％(NH4)2SO4。分离纯化后所得的硫酸软骨素蛋白含量为0.9％，澄清，白色；岩藻聚糖硫酸酯蛋白含量为1.6％，澄清，乳白色。
综上，本文攻克了海参多糖提取的关键技术点，能制备出品质良好的海参粗多糖、海参硫酸软骨素及海参岩藻聚糖硫酸酯。本文结果为海地瓜及海地瓜多糖的开发利用提供了理论基础，并有望促进海参深加工及低值海参高值化综合利用的发展。
海参;海地瓜多糖;质量评价体系;蛋白含量测定;提取工艺
中国海洋大学
硕士
水产品加工及贮藏工程
薛长湖
2012
中文
TQ914.2
71
2012-12-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）