雌激素受体在许氏平鲉繁殖周期中生理作用的初步研究
许氏平鲉是我国黄渤海常见的经济鱼类之一。本文以山东近海网箱养殖许氏平鲉为研究对象,运用组织学、内分泌学方法以及分子生物学方法,对许氏平鲉卵巢发育、血浆性类固醇激素及其受体基因克隆、表达的周年变动等进行了系统的分析与研究,所得结果与结论如下:
1.许氏平鲇卵巢发育周期变化的组织学研究
许氏平鲉的卵巢呈长囊状,左右两瓣大小略微不同。卵巢前端各由一条较粗的含有明显血管的卵巢系膜固定,后端于一较短生殖道处汇合,经生殖孔开口体外。
许氏平鲉的卵巢发育可以划分为7个期,卵母细胞的发育分为6个时相。9月份至11月份是许氏平鲉卵巢内的初级卵母细胞逐渐步入大生长期的阶段,卵母细胞内开始有卵黄物质的积累。此后至翌年4月中下旬,初级卵母细胞逐步完成卵黄物质的积累过程达到成熟。5月份的许氏平鲉进入怀孕期。雌鱼体内的受精卵胚在体内同步发育,至翌年5月底至6月上旬,发育完善的卵胚才孵化出膜,由母体一次性排出体外。
2.许氏平鲉血浆性类固醇激素水平的周年变化研究
利用I125标记的放射免疫测定方法(RIA)检测雌雄许氏平鲉血浆中睾酮(Testosterone,T)、雌二醇(Estradiol,E2)和孕酮(Progesterone,P)含量的周年变动水平,结果表明:雌雄许氏平鲉血浆E2和P含量的周年变动趋势相似。雌性许氏平鲉E2和P的含量均在繁殖前期达到峰值,怀孕期后发生明显(P<0.05)的下降；T含量则随着卵巢的发育逐渐增加,至怀孕期达到顶峰。雄性许氏平鲉血浆E2和P含量均在精子发生早期和退化吸收期发生了一次增长,推测两种性类固醇激素可能对精子发生和精巢复发具有重要作用；雄鱼血浆T含量在精子发生早期出现一次明显的增长,说明T可以有效促进精子的发生。
3.许氏平鲉雌激素受体(ERs)基因的克隆及其表达分析
本实验首次克隆得到许氏平鲉三种ERs基因。ERαcDNA全长共计2972bp,包含一个开放阅读框,可以编码624个氨基酸；ERβ1cDNA全长2451bp,包含一个开放阅读框,可以编码561个氨基酸；ERβ2cDNA全长2338bp,包含一个开放阅读框,可以编码659个氨基酸。本文利用多种生物学软件将许氏平鲉ERs与其他硬骨鱼类及哺乳动物的ERs序列进行比较,发现了ERs的一些共有结构特点,也发现了许氏平鲉ERs的一些特有特点。本实验利用RT-PCR方法,检测了雌雄许氏平鲉性腺、肝脏、脾脏、肾脏、脑、肠、鳃、心、胃、脂肪、盲囊、头肾和肌肉共13种组织中ERs的表达情况。结果表明,许氏平鲉ERα在雌鱼各组织中较雄鱼各组织中的表达广泛,包括一些非生殖组织中都有表达,如肠、脂肪和头肾。然而,仅在雄鱼肝脏和精巢中检测到了ERα的mRNA表达。许氏平鲉ERβ1在雌鱼体内的表达同样比雄鱼广泛。ERβ1在雌鱼性腺中的表达丰富度最高,除肌肉超出了ERβ1-mRNA的信号检测极限外,其他组织中都有表达,但鳃中的表达最弱。雄鱼中ERβ1在肝脏中表现出最丰富的表达,其次为精巢,肠、盲囊、头肾和肾中也有ERβ1的表达,其他组织中未能检测到ERβ1的表达。许氏平鲉ERs在性腺中的时间表达模式是与性腺发育相关的,尤其雄鱼的ERsmRNA表达与性腺发育呈现出明显相关性。
许氏平鲉;网箱养殖;卵巢发育;雌激素受体;繁殖周期;生理作用
中国海洋大学
硕士
水生生物学
温海深
2011
中文
S965.399;S967.3
112
2011-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）