海藻中岩藻黄素的分离鉴定及抗肿瘤活性研究
岩藻黄素是海藻中特殊类胡萝卜素的重要种类之一，具有抗肥胖、调节血糖、抗肿瘤、清除自由基、抗氧化、抗血管新生等多种生理活性，在人体健康、家禽水产等方面发挥着特殊的重要作用。我国藻类资源丰富，而主要存在于褐藻和硅藻类植物中的岩藻黄素是一种杰出的健康食品补充剂、添加剂和有效的防癌药物。本文以褐藻及其加工品和硅藻为原料，建立了从中分离提取岩藻黄素的工艺方法；确定最佳HPLC条件，建立海藻中岩藻黄素的HPLC定量检测方法。最后对从裙带菜中分离纯化的岩藻黄素进行体外抗肿瘤活性的初步研究，确定了岩藻黄素在抗肿瘤方面的活性特点。为今后藻类中岩藻黄素的食(药)用开发利用以及营养评价提供理论研究基础和科学依据。主要内容包括以下几个部分：
1、建立了褐藻和硅藻中岩藻黄素的分离纯化工艺流程，得到褐藻及其加工品和三种微藻中岩藻黄素的含量和差异，并对分离得到的岩藻黄素进行结构鉴定。该分离方法简单易行，分离所得岩藻黄素纯度高达9096左右。
2、针对褐藻和硅藻中色素分布的复杂度不同，建立了两种检测岩藻黄素的HPLC色谱条件。在这两种检测条件下，岩藻黄素特征峰保留时间一致，都在9.5min左右，峰形理想。
3、建立了测定海藻中岩藻黄素含量的HPLC方法。该方法线性关系良好，且重复性好、精确度高，为检测食品原料中岩藻黄素的含量和建立岩藻黄素质量标准提供了方法基础。
4、本文对岩藻黄素的体外抗肿瘤活性进行了初步的探讨，采用MTT法对从裙带菜中分离得到的岩藻黄素的抗肿瘤活性进行筛选。在此基础上，选用HepG2细胞株采用形态学观察、AO/EB染色法对岩藻黄素体外抗肿瘤活性及其可能机制进行了探讨；采用划痕法、细胞粘附实验、Transwell小室法，系统研究了岩藻黄素对HepG2细胞迁移、粘附、侵袭三个方面能力的影响；采用体外小管形成实验、CAM模型体外模拟肿瘤侵袭、转移和血管新生的过程，研究了岩藻黄素对肿瘤血管新生的影响。证明岩藻黄素能够抑制肿瘤细胞增殖、转移、侵袭和CAM上血管新生。
本文首次全面系统地从分离提取、结构鉴定、含量检测和生理活性四个方面对海藻中的岩藻黄素进行了研究，丰富了岩藻黄素研究领域，填补了国内空白，为其今后的综合利用提供了科学依据和实验基础。
中国海洋大学
硕士
水产品加工与贮藏工程
薛长湖
2010
中文
R284.2
2011-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）