壳聚糖、羧甲基壳聚糖包覆V<,E>脂质体的制备及性能评价
脂质体(Liposome)是磷脂(Phospholipids)分散在水中时形成的一种类似生物膜结构的双分子层微小囊泡，用作药物载体具有良好的生物相容性而无免疫原性，但其稳定性欠佳，不易储存，限制了其广泛应用。壳聚糖(Chitosan，CS)是甲壳素(Chitin)部分脱乙酰基的产物，材料来源相当广泛，是一种天然聚阳离子碱性多糖，用作药物载体具有较好的生物相容性和生物可降解性。羧甲基壳聚糖(Carboxymethyl chitosan，CMCS)是CS经羧甲基化反应得到的CS的一类重要衍生物，与CS相比CMCS不仅保留了CS的优良特性，而且CMCS具有良好的水溶性。
以化妆品中常用的功能性原料维生素E(Vitamin E，VE)为疏水性模式药物分别制备了负电性VE脂质体(Negatively Charged Vitamin E Liposome)和正电性VE脂质体(Cationic Vitamin E Liposome)。以分子量(Molecular Weight，MW)1380×KDa，脱乙酰度(Degree of Deacetylation，DD)84.5％的CS为原料，制备四种不同MW的CS和三种不同MW的CMCS，用四种不同MW的CS包覆负电性VE脂质体；用三种不同MW的CMCS包覆正电性VE脂质体。透射电镜观察CS、CMCS包覆VE脂质体前后外观的变化及测定Zeta电位变化，证明两种包覆VE脂质体成功制备。
对比五种制备VE脂质体的方法，薄膜水化法得到的VE脂质体的包封率最高为82.5％，4℃避光保存24h后的保留率高达91.4％。采用薄膜水化法制备VE脂质体各原料最佳配比为：磷脂：VE：胆固醇=20：1：1.875。电镜图片表明：脂质体呈球形或近球形，颜色较浅。单个观察脂质体可以明显分辨其粒径大小，并发现其外观呈现脂质体的典型特征-指纹状结构。VE脂质体的平均粒径为35.2nm，粒径分布较为均匀、集中。
用CS、CMCS包覆VE脂质体后，两者外观均呈球形或近球形，颜色较未包覆脂质体都明显加深，脂质体的典型特征(指纹状结构)皆消失。考查不同MW的CS和CMCS包覆之后的两种VE脂质体的包封率、产率和载药量的变化，结果显示：包覆之后两种VE脂质体的包封率、产率和载药量均有所降低，其降低程度与CS、CMCS的MW大小无关；考查相同MW不同浓度的CS和CMCS包覆前后两种VE脂质体的包封率、产率、载药量的变化，结果显示：包封率、产率和载药量随CS、CMCS溶液浓度的增大而降低，其中，最低浓度(C=0.1％)的CS、CMCS分别使两种脂质体对VE的包封率降低了9.3％和4.3％。说明由于CS、CMCS的存在导致脂质体中部分VE的泄露。考查CS、CMCS包覆前后脂质体在4℃，25℃，37℃避光条件下保存不同时间VE的保留率和脂质体混悬液的沉降率，结果表明：CS、CMCS的包覆，明显提高了VE脂质体对VE的保留率，降低了VE脂质体混悬液沉降率。研究CS和CMCS的MW对包覆VE脂质体中VE的保留率和脂质体混悬液的沉降率的影响，结果发现：CS、CMCS的MW对保留率、沉降率的影响不大。同时，研究相同MW不同浓度的CS、CMCS对保留率、沉降率的影响，发现CS、CMCS的浓度对保留率、沉降率的影响显著：CS、CMCS浓度越大保留率越高、沉降率越低。4℃条件下避光保存7d，0.8％CS包覆VE脂质体较未包覆VE脂质体VE的保留率提高了37.0％，沉降率降低6.6％；37℃条件下，两种未包覆脂质体中VE的保留率下降速率最快，到第7d时皆已下降到0，而同样时间内浓度0.8％的CS、CMCS包覆的VE脂质体的VE保留率分别为：9.9％和13.5％。CS、CMCS包覆VE脂质体虽然使脂质体对VE包封率略有降低，但有效提高了在避光储存、不同温度条件下VE的保留率，降低了脂质体混悬液的沉降率。即CS、CMCS包覆VE脂质体有效提高了VE脂质体的储存稳定性，为今后脂质体技术的实际应用和生产开发提供重要的保障。
包覆脂质体;壳聚糖;羧甲基壳聚糖;维生素E
中国海洋大学
硕士
细胞生物学
刘成圣
2009
中文
TQ464
78
2009-10-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）