砂海星主要活性物质的制备及酸性粘多糖的活性研究
砂海星(Luidia quinaria Von Martens)，属棘皮动物门(Echinodermata)海星纲(Asteroidea)，约占山东沿海海星资源总数的24％，主要分布在渤海中部和烟威渔场近海岸水域等盐度较高的海域。本文通过对砂海星酸性粘多糖及其它活性成分的制备和活性研究，可以为今后开发利用此类生物资源打下前期的基础，为砂海星资源的开发利用提供依据。
(1)酸性粘多糖的制备：利用碱提法从黄海产砂海星中提取酸性粘多糖，粗品中糖和蛋白含量分别为29.5％和65.7％；Sevag法脱蛋白后，糖含量57.1％，蛋白含量13.8％；二次酶解后，糖和蛋白含量分别为63.2％和7.0％；提取物中含有硫酸基；25％的组分用离子交换层析(DE-52)和葡聚糖凝胶(G-75)进行分离、纯化，至少含有三个组分：用葡聚糖凝胶(G-100)对其分子量进行测定，其平均分子量约为12kD；琼脂糖凝胶电泳结果表明，该糖带负电。
(2)多不饱和脂肪酸的提取：采用溶剂萃取和硅胶柱层析相结合的方法，从砂海星中提取脂肪并精制，其产率为1.18％。将精制脂肪进行气相色谱分析，结果表明，砂海星中含有丰富的不饱和脂肪酸，其种类共计约有24种，其中，二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量丰富。利用硅胶柱层析可以实现EPA和DHA的富集。经硅胶柱后，石油醚部分多不饱和脂肪酸的含量为57.564％，其中，EPA和DHA分别为46.015％和3.934％；乙酸乙酯部分多不饱和脂肪酸含量为54.948％，其中EPA和DHA分别为42.718％和3.705％。
(3)分离纯化砂海星皂苷单体：采用85％乙醇水溶液反复提取的经典提取法，经石油醚脱脂、水饱和正丁醇萃取、丙酮沉淀从黄海产砂海星中制取海星总皂苷，总皂苷经大孔吸附树脂层析，葡聚糖凝胶LH-20层析等方法分离纯化得到海星皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，再经反复葡聚糖凝胶柱层析得到精制海星皂苷Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、Ⅲ2、Ⅲ3，高效液相色谱法鉴定精制结果峰Ⅰ1、峰Ⅱ2呈现单峰。经泡沫实验，颜色反应实验，沉淀反应实验表明提取物为甾体皂苷。
(4)酸性粘多糖的活性实验：以昆明种小鼠为实验动物，研究了砂海星氨基多糖(GAG)降血脂作用．结果表明，GAG能显著降低高脂饮食小鼠的TG，TC，LDL-C，并能显著提高LDL水平，能有效抑制高脂饮食小鼠血脂的升高，将血脂的各项指标控制在正常范围内：利用实验中制备的酸性粘多糖粗制品采用MTT法进行体外抗肿瘤实验，结果表明1.0mg/ml实验组具有显著的抗肿瘤活性，24h内对HL-60细胞的抑制率达58.2％．
总之，研究表明砂海星作为海洋生物中一个小的类群，含有丰富的营养成分和多种活性物质，具有一定的保健和药用价值。
砂海星;活性成分;提取分离;生物活性;抗肿瘤实验
中国海洋大学
硕士
海洋生物学
唐学玺
2009
中文
TQ464.1
68
2009-10-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）