四种真菌毒素检测方法的建立以及赭曲霉毒素A脱除方法的初步研究
真菌毒素，是某些真菌产生的代谢产物或二级代谢产物，通常存在于霉变的谷物中，一旦通过食物链进入人体后，将可能造成致畸，致突变和致癌等严重危害，因此在全球食品安全中备受关注。目前，真菌毒素的检测方法较多，其中高效液相色谱法精密度最高。本论文按照真菌毒素研究学者普遍认同的菌属产毒的分类方法，针对不同菌属产生的真菌毒素具有分子结构式相似的特点，选出具有代表性的四种真菌毒素，同时针对不同的食品，系统的建立了这四种真菌毒素的免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法，方法操作简便、准确，回收率高、精密度良好、重现性好，最终并且初步研究了赭曲霉毒素A的微生物脱毒方法。
赭曲霉毒素A的免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法的建立。经甲醇－水或碳酸氢钠－水溶液提取，提取液稀释过滤后经过含有赭曲霉毒A特异性抗体的免疫亲和柱层析净化，洗脱液用C18色谱柱分离，荧光检测器测定。流动相为乙腈:水:乙酸为99:99:2；激发波长333nm；发射波长477nm；柱温35℃；进样量100μl；外标法定量，结果表明，色谱峰面积与含量之间有良好的线性关系，方法的检出限为0.2μg/kg，加标回收率为90.3％～106％，对不同浓度的样品相对标准偏差RSD为1.75％～4.32％。
T－2毒素的免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法的建立。经甲醇－水溶液提取，提取液稀释过滤后经过含有T－2毒素特异性抗体的免疫亲和柱层析净化，洗脱液用C18色谱柱分离，用1－葸腈(1－AN)来将其衍生，荧光检测器测定。流动相为乙腈：水=75:25；激发波长381nm；发射波长470nm；柱温35℃；进样量20μl；外标法定量，结果表明，色谱峰面积与含量之间有良好的线性关系，方法的检出限为5μg/kg，加标回收率为82.6％～103.2％，对不同浓度的样品相对标准偏差RSD为1.9％～5.6％。
玉米赤霉烯酮的免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法的建立。试样经乙腈－水溶液提取，提取液稀释过滤后经过含有玉米赤霉烯酮特异性抗体的免疫亲和柱层析净化，洗脱液用C18色谱柱分离，荧光检测器测定。流动相为乙腈:水:甲醇为46:46:8；激发波长274mm；发射波长440nm；柱温35℃；进样量100μl；外标法定量，结果表明，色谱峰面积与含量之间有良好的线性关系，方法的检出限为0.1μg/kg，加标回收率为69.3％～101.3％，对不同浓度的样品相对标准偏差RSD为5.0％～11.6％。
呕吐毒素的免疫亲和层析高效液相色谱的检测方法的建立。试样经聚乙二醇水溶液提取，提取液稀释过滤后经过含有呕吐毒素特异性抗体的免疫亲和柱层析净化，洗脱液用C18色谱柱分离，荧光检测器测定。流动相为甲醇:水为20:80；检测波长218nm；柱温35℃；进样量50μl；外标法定量，结果表明，色谱峰面积与含量之间有良好的线性关系，方法的检出限为0.1mg/kg，加标回收率为65.8％～85.9％，对不同浓度的样品相对标准偏差RSD为3.1％～6.8％。
此外本实验发现，红发夫酵母对赭曲霉毒素A的脱除效果最为理想，可以将赭曲霉毒素A转化为赭曲霉毒素a，另外对红发夫酵母对赭曲霉毒素A的脱毒条件进行了优化，发现红发夫酵母在30摄氏度可以保持较高活性，脱毒13天，温度在25－－35摄氏度时红发夫酵母对赭曲霉毒素A的降解率最高，可以达到80％以上。
赭曲霉毒素A;T-2毒素;玉米赤霉烯酮;脱氧镰刀菌烯醇;脱毒方法
中国海洋大学
硕士
水产品加工与贮藏工程
林洪
2009
中文
TS201.3
79
2009-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）