刺参中皂苷成分HPLC/ELSD特征图谱研究及其应用
海参为棘皮动物门(Echinodermata)海参纲(Holothurioidea)动物的总称,在我国是海洋中重要的食物资源和药物资源。海参中含有多种活性物质,其中海参皂苷是一类三萜皂苷,具有抗真菌、溶血作用、细胞毒性、细胞生长抑制作用、抑制肿瘤和免疫调节作用。
本文以北方常见的食用刺参为研究对象,对不同产地和市售的不同处理方法的刺参中皂苷总提物选取HPLC-ELSD进行了检测方法研究,优化选择了流动相,确定了蒸发光检测器的检测条件,最终确定了刺参中皂苷的HPLC-ELSD检测条件,并利用该HPLC-ELSD条件,建立了刺参皂苷的特征图谱,为刺参及刺参产品的质量控制提供了科学依据。
1.刺参粉碎成粗粉,以65%乙醇80℃水浴回流提取2h×3次,每次加入65%乙醇60ml。合并提取液,旋转蒸发至浸膏状。把浸膏分散至水中,提取物分别经石油醚脱脂、水饱和正丁醇萃取。正丁醇部分减压蒸干得粗总皂苷浸膏。使用60%甲醇溶解浸膏,12000 r/min离心,取上清液进样。
2.经过对流动相选择和蒸发光散射检测器(ELSD)的参数的优化,得到刺参皂苷HPLC-ELSD特征图谱检测条件为:色谱柱:Symmetry C18(150mm×4.6mm,5μm),采用0.2%乙酸水溶液-乙腈进行梯度洗脱,流速1.0ml/min;柱温30℃;蒸发光散射检测器的漂移管温度为70℃,载气压力25 psi。
3.在对方法进行方法学验证后,利用所得的检测方法对刺参产品进行了分析,得到刺参产品的皂苷成分的特征谱图,发现所有的产品均有6号共有峰,该峰可做为判断是否含有刺参皂苷的根据。
4.对5种刺参制品和2种含有皂苷成分的植物(人参和黄芪)进行皂苷提取分析。结果表明,方法对检测刺参皂苷具有良好的专属性。
海参皂苷;食用刺参;HPLC-ELSD;刺参皂苷;高效液相色谱;蒸发光散射检测器
中国海洋大学
硕士
药物化学
吕志华
2009
中文
R282.740.5
62
2009-09-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)