生物胺在对虾酚氧化酶原系统激活过程中作用机制的研究
本文研究了生物胺(biogenic amine，BA)在对虾酚氧化酶原系统激活过程中的作用机制。主要探讨了①3种生物胺对凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei血细胞数量和酚氧化酶原胞吐的影响；②多巴胺(dopamine，DA)对凡纳滨对虾血细胞作用途径的初步研究；③注射多巴胺、病原菌(Vibrio alginolyticus)对凡纳滨对虾血淋巴生物胺含量和酚氧化酶原系统的影响；④注射多巴胺、病原菌对凡纳滨对虾免疫力的影响。主要结果如下：
1.3种生物胺对凡纳滨对虾血细胞数量和酚氧化酶原胞吐的影响
多巴胺、去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)和5-羟色胺(serotonin，5-HT)对凡纳滨对虾三类血细胞、总血细胞数量、血细胞酚氧化酶原活力和血细胞释放的酚氧化酶活力影响显著(P<0.05)，且具有时间剂量效应。0.5、1.0和3.0μM的3种生物胺作用20min均会引起对虾三类血细胞数量、总血细胞数量和血细胞酚氧化酶原活力显著降低，血细胞释放的酚氧化酶活力显著升高。相同浓度作用相同时间时，三种生物胺对上述指标的影响从大到小依次为多巴胺、去甲肾上腺素和5-羟色胺。对照组上述各指标在实验时间内均无明显变化。
2.多巴胺对凡纳滨对虾血细胞作用途径的初步研究
1μM多巴胺作用20min后，三类血细胞数量、总血细胞数量和血细胞酚氧化酶原活力显著降低，血细胞释放的酚氧化酶活力显著升高(P<0.05)。在多巴胺作用前用10、100和500μM D1类多巴胺受体拮抗剂剂SCH23390和D2类多巴胺受体拮抗剂剂舒必利单独或混合孵育20min可显著抑制(但并未完全抑制)多巴胺对三类血细胞数量、总血细胞数量、血细胞酚氧化酶原活力和血细胞释放的酚氧化酶活力的影响(P<0.05)。
两种受体拮抗剂对上述各指标的作用具有剂量效应，随作用浓度的增大，抑制效果更加明显；相同浓度的SCH23390比舒必利抑制作用更强；两种受体拮抗剂混合作用比单独使用一种效果显著。
3.注射多巴胺、病原菌对凡纳滨对虾血淋巴生物胺含量和酚氧化酶原系统的影响
注射50μl10-6 mol1-1、10-7 mol1-1多巴胺或6.0×105 cells ml-1、6.0×106 cellsml-1溶藻弧菌对凡纳滨对虾血淋巴中3种生物胺含量、三类血细胞和总血细胞数量、血细胞丝氨酸蛋白酶和酚氧化酶原活力、血淋巴酚氧化酶和蛋白酶抑制剂活力影响显著(P<0.05)，且具有时间剂量效应。除多巴胺处理组的丝氨酸蛋白酶活力外，其余各指标均呈峰值变化，但是达到峰值和趋于稳定的时间具有不同步性。
注射多巴胺、病原菌后凡纳滨对虾血淋巴中5-羟色胺含量变化趋势相似，分别在1h、6h和3h前显著升高，而多巴胺含量变化趋势相反，分别在3h达到最高和最低值，注射多巴胺组去甲肾上腺素含量3h前显著升高，而注射病原菌组则在1h时达到最大值，之后显著下降。注射多巴胺或6.0×106 cells ml-1溶藻弧菌的凡纳滨对虾总血细胞数量均显著降低，而6.0×105 cells ml-1溶藻弧菌处理组三类血细胞和总血细胞数量在3h前显著升高，之后缓慢下降，6h后趋于稳定；大颗粒细胞比例在3h前略有升高；除多巴胺处理组的丝氨酸蛋白酶活力外，其余酶活各指标分别在1-6h内达到最高或最低值。稳定后，除病原菌处理组的5-羟色胺含量，多巴胺和6.0×106病原菌处理组透明细胞、小颗粒细胞和总血细胞数量，多巴胺处理组丝氨酸蛋白酶活力明显低于对照组外，其余各指标与对照组差异不显著。对照组上述各指标在实验时间内无显著变化。
4.注射多巴胺、病原菌对凡纳滨对虾免疫力的影响
注射10-6 mol1-1、10-7 mol1-1多巴胺或6.0×105 cells ml-1、6.0×106 cells ml-1溶藻弧菌对凡纳滨对虾血淋巴中3种生物胺含量、总血细胞数量、血细胞吞噬活力、血浆酚氧化酶活力、溶菌活力和血蓝蛋白含量影响显著。生物胺含量和总血细胞数量结果与3.中相同。
注射多巴胺或病原菌后，血细胞吞噬活力分别于6h和3h达到最小和最大值，并分别与注射剂量成负相关和正相关；注射多巴胺或6.0×106 cells ml-1溶藻弧菌后溶菌活力于3h达到最小值，6h后趋于稳定，而6.0×105 cells ml-1溶藻弧菌处理组溶菌活力于3h前显著升高；多巴胺和病原菌处理组酚氧化酶活力分别于6h和1h升到最高，12h、3h后趋于稳定。注射多巴胺或病原菌后血蓝蛋白含量分别于6h和3h达到最大和最小值，24h后保持稳定。
稳定后除多巴胺和6.0×106 cells ml-1病原菌处理组溶菌活力显著低于对照组，病原菌处理组血蓝蛋白活力显著低于对照组外，其余指标与对照组差异不显著。对照组上述各指标在实验时间内无显著变化。
生物胺;凡纳滨对虾;酚氧化酶原系统;激活过程;作用机制;免疫力
中国海洋大学
硕士
动物学
潘鲁青
2009
中文
S945.46;S942.5
64
2009-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）