海洋弧菌(Vibrio sp.H)褐藻胶裂解酶的特性及对褐藻胶酶解产物的研究
本文利用从威海近海天然腐烂的海带中分离得到褐藻胶降解菌株，以海藻酸钠为唯一碳源，通过培养、初筛、复筛后得到一株优势海洋弧菌(菌株Vibrio sp.H)，本菌株为革兰氏阴性、杆状、有鞭毛、可运动；该菌株为兼性厌氧，最适NaCl浓度为4％，最适生长温度为25℃，最适生长pH为6.5；判断为氧化酶反应阳性，发酵葡萄糖产酸不产气，对弧菌抑制剂敏感，不发光，不产色素；推断该菌株(Vibrio sp. H)属于弧菌科弧菌属(Vibrio sp.)
本论文对该褐藻胶裂解酶的性质进行了研究，得出该酶分子量约为56.2KD，酶比活力为123.23U/mg，最适温度为25℃，最适pH为6.5，酶动力常数Km值约为76.35g/L。由该裂解酶对金属离子作用中发现，含有EDTA和Zn2+时，对(M)n段褐藻胶、(G)n段褐藻胶和褐藻胶有明显的促进作用，Ba2+对(M)n段褐藻胶、(G)n段褐藻胶和褐藻胶有一定的抑制作用，Zn2+对(M)n段褐藻胶有明显的促进作用。该裂解酶适宜褐藻胶底物浓度为3％，并且该酶对(M)n段褐藻胶中甘露糖醛酸降解效果较好。
选择合适的浓度褐藻胶底物，通过Vibrio sp.H裂解酶降解褐藻胶，获得不同产物嵌段组分Poly(M)和Poly(G)，进一步研究Poly(M)和Poly(G)性质，得出以下结论：
外观性质上Poly(M)为白色的固体，水溶液为无色，PH为6.96; Poly(G)为淡黄色的固体，水溶液为淡黄色，PH为7.98。Poly(M)和Poly(G)的吸收分别在220～250nm处和230～250nm处；在可见处无吸收。Poly(M)和Poly(G)的炭化温度为226～285℃、236～275℃；旋光度都为左旋，约-0.5～-0.65之间。根据寡糖的电泳分析可见，该裂解酶对褐藻胶中Poly(M)的降解程度大于其对Poly(G)的降解程度。根据GPC分析，Poly(M)重均分子量为601，大约得到三聚体寡糖；Poly(G)的分子量3177，大约得到十六聚体多糖。由IR的结果分析可见，在940nm附近Poly(G)的特征吸收比Poly(M)的特征吸收强。
海洋弧菌;褐藻胶裂解酶;褐藻寡糖
中国海洋大学
硕士
生物工程
韩宝芹;王勇强
2009
中文
Q557
59
2009-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）