产甲壳素酶菌株的筛选、发酵条件优化和酶学性质研究

屈宁

中国海洋大学

摘要：

本研究是从土壤中分离筛选得到菌株D和菌株S，研究表明，混合发酵培养其产酶的能力显著的提高，其产酶最适培养基组分为(％，w/v)：尿素1.0，K2HPO4 0.07，KH2PO4 0.03，MgSO4 0.05，酵母粉0.5，甲壳素1.0。摇瓶发酵条件：pH5.5，2％(v/v)接种量，32℃，130rpm培养72h，500mL锥形瓶培养基装量为100mL。在最适产酶发酵条件下，甲壳素酶活力可达到 1.19 U/mL。采用40％-80％(NH4)2SO4分级盐析、透析脱盐、甲壳素亲和层析、Sephadex G-75凝胶过滤等分离纯化技术，获得了纯化的甲壳素酶。制品经过SDS-PAGE电泳，该甲壳素酶呈单一条带，分子量约为45kD。对该酶进行部分酶学性质的研究表明：该甲壳素酶的最适作用温度为60℃，最适反应pH为pH5.0；最适反应底物为粉末甲壳素；金属离子Fe2+，Mn2+对酶活力有明显的促进作用，Cu2+、Zn2+则对酶活力具有明显的抑制作用；该酶除能降解甲壳素，对壳聚糖和羧甲基甲壳素也有一定的降解作用。该酶有较好的稳定性。

关键词：甲壳素酶;发酵条件优化;酶学性质

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：海洋生物

导师姓名：韩宝芹

学位年度：2008

语种：中文

分类号：O629.8;Q55

页数：57

在线出版日期：2008-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）