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沙海蜇ACE抑制肽制备及预防高血压效果与机理研究

李伟伟
中国海洋大学
引用
我国沙海蜇资源丰富,近年来甚至频繁出现爆发,但由于目前沙海蜇的加工方式比较单一,使沙海蜇资源没有得到充分利用。本文试图建立一种新的沙海蜇加工方法,即将其酶解、脱腥、脱盐、喷雾干燥后制成一种新的食源性ACE抑制肽,并对沙海蜇ACE抑制肽预防高血压的效果和机理进行研究。  首先,对用碱性蛋白酶酶解新鲜沙海蜇制备 ACE抑制肽的酶解条件进行了研究。先后以水解度(DH)和ACE抑制率为指标,经单因素实验和正交实验得到最佳的酶解条件为:酶解温度50℃、加酶量5%、酶解起始pH9.5。采用改进的高效液相色谱法测定 ACE抑制率,发现新鲜沙海蜇在以上条件下酶解7h时所得多肽的ACE抑制率最大。所得ACE抑制肽脱盐冻干后,测定在0.5mg/mL浓度时 ACE抑制率为54.53%。最后,通过排阻色谱法测得其相对平均分子量约为500Da。  然后,对沙海蜇ACE抑制肽酶解液进一步加工制备成ACE抑制肽的工艺条件进行了研究。该工艺条件主要包括脱腥、脱盐和喷雾干燥三个过程,并对制得的沙海蜇 ACE抑制肽的成分进行了分析。以蛋白质损失率(%)和三甲胺含量(mg/L)为指标,经单因素实验和正交实验得到最佳的脱腥条件为:活性炭添加量(w/v,g/mL)0.2%,脱腥温度20℃、脱腥时间40mim。脱腥后的沙海蜇酶解液经减压浓缩、0.45μm滤膜抽滤,200纳滤膜脱盐,喷雾干燥(进风温度165-175℃,出风温度85-95℃)后得到白色沙海蜇ACE抑制肽粉,并测得其蛋白质含量为81.50±0.42%、水分含量为6.23±0.24%、盐分含量为2.88±0.11%、脂肪含量为0.21±0.03%、糖分含量为5.97±0.21%,为低脂低糖的健康功能性食品。  最后,研究了所得沙海蜇ACE抑制肽对L-NAME致高血压发生的预防作用和机理。80只大鼠随机分成5组,对照组灌胃蒸馏水(0.5mL/d),L-NAME组灌胃L-NAME(20mg/Kg.bw),低、高剂量沙海蜇ACE抑制肽组(简称低、高剂量组)灌胃 L-NAME(20mg/Kg.bw)的同时分别灌胃100mg/Kg.bw和500mg/Kg.bw的沙海蜇ACE抑制肽,卡托普利组灌胃L-NAME(20mg/Kg.bw)的同时灌胃10mg/Kg.bw的卡托普利。灌胃前和灌胃1、2、3周时测量大鼠体重和血压。灌胃1周后,5组大鼠血压差异明显。为研究大鼠血压和血浆中血压相关因子的关系,5组大鼠各处死一半(8只),测定血浆中ACE、肾素(PRA)、NO、NO合成酶(NOS)、AngⅡ的活性或含量。灌胃3周后,处死剩余大鼠,测定大鼠血浆和尿液中ACE、NO、NO合成酶(NOS)及尿微量蛋白(MAU/ALB)的含量,并计算心脏和肾脏指数。结果发现,灌胃L-NAME可使大鼠血浆中NO和 NOS含量降低,同时激活 RAAS,并导致血压的显著升高。但可能是由于L-NAME的灌胃剂量不够高,灌胃L-NAME后大鼠血压先上升然后下降并逐渐趋于正常水平。沙海蜇 ACE抑制肽在 L-NAME致高血压模型中可以起到抑制ACE活性、AngⅡ含量上升,促进L-NAME导致的高血压向正常水平回复的作用,还可以减小因灌胃L-NAME导致心脏和肾脏的损伤。高剂量组效果强于低剂量组。

沙海蜇;ACE抑制肽;制备工艺;高血压;心肾损伤

中国海洋大学

硕士

食品科学

李八方

2014

中文

R284.2;R259:R544.1;R285

81

2015-04-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)