HSP90抑制剂的筛选及活性化合物抗肿瘤作用研究
热休克蛋白90(HSP90)作为细胞内蛋白质保持其正确构象的重要分子伴侣，参与包括细胞增殖、运动及血管新生在内的诸多细胞生理活动。近年来研究发现HSP90在肿瘤细胞中呈现出持续的高诱导表达且与肿瘤的发生、发展密切相关。HSP90可作为肿瘤信号网络中的关键节点蛋白，通过与肿瘤密切相关的激酶、转录因子等多个客户蛋白相互作用，级联放大肿瘤相关效应，从而促进肿瘤的发生发展。抑制HSP90可以通过降解其客户蛋白从而同时干预肿瘤发展中功能异常的多个靶点并抑制其相关信号通路，发挥一药多靶的抗肿瘤作用。基于以上优势，HSP90目前已成为抗肿瘤治疗的热点领域之一，已有多个HSP90抑制剂进入临床I-III期试验并取得良好的治疗效果。 通过与化学家合作，我们得到了一批基于片段组合设计的新型 HSP90抑制剂，分子水平的荧光偏振技术初筛发现FS81具有较好的活性，随后我们对FS81的抗肿瘤活性进行了系统的体内外评价。 对化合物FS81的抗肿瘤广谱性研究发现，FS81对多种组织来源的肿瘤细胞株均具有显著的增殖抑制作用，IC50在11-931nM之间，与阳性药NVP-AUY922相当。进一步信号通路研究发现，FS81能剂量依赖性的降解细胞内包括c-Met、EGFR、ALK、HER2等在内的诸多客户蛋白，并伴随着下游主要信号分子AKT、ERK磷酸化水平的降低和Hsp70诱导反馈性上调。细胞生物学效应研究显示，FS81主要通过诱导肿瘤细胞产生G2/M期阻滞及激活caspase途径依赖的细胞凋亡来发挥其抗肿瘤活性。划痕试验和Transwell小室实验表明，FS81能显著抑制肿瘤细胞的迁移运动，此外FS81还能通过抑制HUVEC增殖及管腔形成发挥其抗血管新生活性。体外心脏安全性评价显示化合物FS81具有较低的心脏毒性。但体内结果表明，FS81对人神经胶质瘤U87-MG裸小鼠移植瘤的生长并没有明显的抑制作用，初步的药代动力学研究提示可能是由于FS81半衰期较短所导致。尽管FS81的体内抗肿瘤活性不甚理想，通过本研究我们为此类化合物进行进一步的结构改造并开发更具前景的HSP90抑制剂提供了重要的实验依据及理论参考。
热休克蛋白90抑制剂;抗肿瘤活性;活性化合物;细胞凋亡
中国海洋大学
硕士
生药学
李静
2013
中文
R979.1
64
2013-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）