壳寡糖处理对灰霉孢子细胞氧化损伤的生化分析

刘佳

中国海洋大学

摘要：

灰霉（Botrytis cinerea）引起的果实腐烂是制约我国水果产业发展的因素之一。化学农药是防治果实采后灰霉病害常用的方法，但化学农药长期使用会污染生态环境、增强病虫害的抗药性和危害人类健康。因此，研发无毒害、无污染的绿色杀菌剂对保护生态环境、减少食品中农药的残留、确保人体健康具有重要的意义。壳寡糖作为一种带正电荷的天然分子具有广谱的抑菌，调控植物生长发育、提高抗病性和抑制病害发生的作用，被认为是一种具有良好应用前景的生物农药，但对其抑菌机理缺乏确切的认知。ROS作为生物体内的一种通用性的信号分子，既可以参与正常的生理反应，亦能对细胞造成伤害。本实验探究壳寡糖处理对灰霉孢子细胞内ROS水平变化以及对细胞内生物分子的氧化损伤的影响，以期揭示其与抑制孢子萌发的内在机制。　　1.从设立空白组、0.05％和0.5%壳寡糖液体培养基处理灰霉孢子的实验结果中可以发现：随着壳寡糖浓度升高和处理时间的延长，灰霉孢子的萌发率降低、H2O2含量升高、脂质过氧化程度加深、蛋白质损伤加深、DNA损伤加深、细胞凋亡程度加深。　　2.外源添加 H2O2的加入对壳寡糖抑菌作用的影响结果表现在促进了灰霉孢子内的H2O2的生成、脂质过氧化、蛋白质氧化损伤、DNA氧化损伤、细胞凋亡，甚至导致了细胞的死亡。　　3.外源添加Vc对壳寡糖抑菌作用的影响结果表现在抑制了灰霉孢子内的H2O2的生成、脂质过氧化、蛋白质氧化损伤、DNA氧化损伤、细胞凋亡。　　4.外源添加CAT对壳寡糖抑菌作用的影响结果表现在相比于CAT更大程度上抑制了灰霉孢子内的H2O2的生成、脂质过氧化、蛋白质氧化损伤、DNA氧化损伤、细胞凋亡。　　综上所述，研究结果表明壳寡糖处理可能诱导灰霉胞内活性氧的升高，高浓度活性氧引起质膜脂质过氧化损伤、胞质蛋白质羰基化和硝基化损伤、DNA损伤，进而导致细胞凋亡和功能丧失。

关键词：壳寡糖;灰霉孢子;细胞氧化损伤;生化分析;氧化损伤;果树病害

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：发育生物学

导师姓名：孟祥红

学位年度：2013

语种：中文

分类号：S436.6

页数：80

在线出版日期：2013-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）