海洋硫酸多糖916的药代动力学分析方法的研究
海洋硫酸多糖916是以海洋甲壳质为原料,经脱乙酰化、羧甲基化和硫酸酯化等多步分子修饰而成聚阴离子硫酸氨基多糖.经系统的药效学、药理学、毒理学研究,发现916具有良好的抗动脉粥样硬化活性,已经国家药品监督管理局批准作为Ⅰ类新药进入临床研究.论文旨在为916的人体药代动力学研究提供前期的探讨工作,考察了916在一定实验条件下的稳定性并且建立了在生物样品兔血清中的高效液相色谱检测方法.在稳定性研究方面,选择生物体液中存在的两种酶--溶菌酶和胰蛋白酶作为考察条件,采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)和明胶比浊法,分别考察不同指标,从分子量及分子骨架是否变化到有效基团是否脱落以确定916的稳定性.其中916的分子量及分子量分布系数采用HPGPC法考察,有效基团硫酸酯基稳定性的考察采用明胶比浊法定量检测样品中游离硫酸根的含量.结果表明在所选择的实验条件下,916对溶菌酶和胰蛋白酶是稳定的,可以推定,在血清中916不会被这两种酶降解.为下一步研究916在生物样品的前处理中及生物机体内的稳定性进行一定的准备.论文首次利用高效液相色谱柱后衍生法测定兔血清中的916浓度,选取盐酸胍作为衍生试剂,并探讨了该衍生反应条件的优化.综合比较几种分析柱如氨基键合柱Asahipak NH<,2>P-50 4E、凝胶柱TSK-Gel.G2000PW、离子排阻柱Aminex HPX-87H的使用效果,确立离子排阻柱Aminex HPX-87H为硫酸多糖916的分析柱.在生物样品兔血清的预处理中,应用多种除蛋白法如蛋白沉淀剂三氯乙酸、高氯酸、锌盐、乙腈、甲醇、乙醇、饱和硫酸铵等沉淀蛋白法、超滤法和胰蛋白酶消化法并加以比较,选择乙腈沉淀法为样品前处理方法,建立了标准曲线及线性范围,确定916在兔血清中的检测限和定量限,分别为2.5μg/ml和10μg/ml,考察了精密度、重现性和回收率,建立了兔血清中916的高效液相色谱检测方法,为916的临床前及临床药代动力学研究提供了方法学基础.
硫酸多糖916;稳定性;兔血清;高效液相柱后衍生荧光色谱法;检测方法
中国海洋大学
硕士
生药学
吕志华;徐家敏
2004
中文
R282.77;R969.1
55
2005-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）