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南极海茸(Durvillaea antarctica)多糖提取、衍生物制备及免疫活性研究

丛大鹏
中国海洋大学
引用
本文通过对南极海茸(Durvillaea antarctica)为原料,通过传统提取方法和纤维素酶提取法提取南极海茸粗多糖。并对传统常温水提所得粗多糖纯化,通过采用硫酸-苯酚法、Folin-酚法、柱前衍生高效液相色谱法和多角度高效凝胶渗透色谱与多角度激光光散射器联用(HPGPC-MALLS)法对DAC的总糖含量、蛋白含量、单糖组成和分子量进行分析,并通过甲基化和气质联用(GC-MS)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振波谱(NMR)对其结构进行表征。对纯化后组分进行衍生物制备及免疫活性方面研究。所得结论主要如下:  本文通过对南极海茸(Durvillaea antarctica)为原料,探讨其多糖的纤维素酶、冷水、热水、碱提取,比较分析了所得粗多糖的理化性质及基本结构表征。采用传统提取方法和纤维素酶提取法,得到17种海茸粗多糖:8种褐藻胶,8种褐藻糖胶,1种两者的混合物。采用纤维素酶提取方法对南极海茸进行提取,酶量越大所提的粗褐藻胶得率越低,粗褐藻糖胶所得量越高,粗总糖所得也越高。纤维素酶法所得粗总多糖量比水提法的要高。纤维素酶-水溶液提取的褐藻胶M/G比明显高于酶提后碱提的褐藻胶,也高于冷水提的褐藻胶,同时酶量越大M/G比越大。南极海茸多糖的纤维素酶法与传统方法所得多糖在单糖及官能团组成基本上无明显差异,但纤维素酶提取的上清醇沉的粗多糖褐藻糖胶、褐藻淀粉分子量比水提、碱提的分子量要大许多。  本文通过对水提组分进行分离与纯化获得1种水溶性葡聚糖(DAC),通过结构表征及体外免疫活性研究,结果表明,纯化得到的DAC是一种总糖含量达97.5%,蛋白含量和分子量分别为2.0%和18.3 kDa的葡聚糖。经甲基化和NMR分析结果表明,DAC是以→3)Glc(β1→为主链,并含有少量→6)Glc(α/β1→分支的葡聚糖。体外免疫活性中在浓度为50μg·mL-1时,DAC对巨噬细胞的吞噬能力促进最强。  本文通过对纯化水溶性葡聚糖进行羧甲基化、磺化及羧甲基化产物磺化制备三种衍生物,并进行体外免疫活性研究。结果表明,三种衍生物分子量均降低,且在不同浓度下有一定的体外免疫活性。

南极海茸;粗多糖;理化性质;结构表征;葡聚糖衍生物;免疫活性

中国海洋大学

硕士

有机化学

夏树伟;于广利

2015

中文

R282.71;R284.1

113

2016-01-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)