棉籽蛋白、鸡毛蛋白生物降解的研究

张永彬

中国海洋大学

摘要：

棉籽蛋白、鸡毛蛋白含有丰富的氨基酸、微量元素、常量元素、维生素以及一些未知生长因子，价格低廉，但动物的消化吸收利用率很低。因此，研究简单可行、经济有效的水解工艺和方法，使其转变成可消化蛋白和复合氨基酸，将其直接作为动物饲料添加剂，或作为进一步提纯氨基酸的廉价易得的原料，既提高了蛋白废弃物的利用率和利用价值，又保护了环境。
本文采用凯氏定氮法测定棉籽蛋白和鸡毛蛋白的总氮量，由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算出蛋白质含量。利用蛋白质与考马斯亮蓝显色原理，用紫外分光光度法测定棉籽蛋白、鸡毛蛋白降解液的吸光度，利用标准曲线与蛋白质的关系求出蛋白质的含量。采用酶解法和微生物发酵法对棉籽蛋白、鸡毛蛋白进行降解，系统考察了酶添加量(％)、pH、反应温度(℃)以及反应时间(h)对中性蛋白酶AS1.398与木瓜蛋白酶水解的影响，利用正交组合设计优化水解工艺，得到了以下结论：
1.通过凯氏定氮法测定的棉籽蛋白的蛋白质含量为45.4％，鸡毛蛋白的为65.8％。
2.利采用考马斯亮蓝法，蛋白质含量在0～16.67mg·mL-1时与吸光度有良好的线性关系，测定所得标准曲线方程为y=0.044 x+0.09，其中R=0.999，RSD=3.86％(n=6)，相对标准偏差小于4％。
3.通过中性蛋白酶AS1.398和木瓜蛋白酶对棉籽蛋白、鸡毛蛋白的水解过程，发现木瓜蛋白酶对棉籽蛋白的水解效果比中性蛋白酶的更好，可溶性蛋白的水解率能达到36％，最佳水解条件为：pH=8.0，反应温度70℃，反应时间8 h，加酶量2.0％；而中性蛋白酶AS1.398对鸡毛蛋白的水解效果更佳，可溶性蛋白水解率能达到37％，最佳水解条件：反应温度50℃，pH=6.4，反应时间8 h，加酶量2.5％。
4.采用微生物发酵法对棉籽蛋白、鸡毛蛋白进行降解，并且与酶解法作比较，会发现微生物发酵法比酶解法的降解作用都要好，操作也更简便，不仅能保证产品的质量不被破坏，还能提高可溶性蛋白的水解率，分别达到43％、41％。

关键词：棉籽蛋白;羽毛蛋白;酶解法;微生物发酵法;生物降解;饲料添加剂

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：应用化学

导师姓名：范玉华

学位年度：2012

语种：中文

分类号：TQ936.1;S816.7

页数：76

在线出版日期：2012-12-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）