壳聚糖基纤维对肝组织创面止血作用的研究
目的：肝脏至少承担着5000种以上的生理功能，是人体最重要的器官之一。由于肝脏是多血管的实质性脏器，外伤时常伴有大量的出血，常用的经典止血方法有直接压迫、结扎和电灼止血等，但死亡率仍达2％-8％，其中出血为最常见的原因。目前临床肝脏外科手术常用的止血材料包括可吸收明胶海绵、氧化纤维素、胶原蛋白海绵和纤维蛋白胶，但由于有些产品或与创面粘附性差，或其准备耗时，在肝脏外伤手术中使用受限。壳聚糖(Chitosan)是甲壳素脱乙酰基的产物，天然无毒、无抗原性、生物相容性好、可生物降解且具有一定的生物活性，壳聚糖经衍生化后具有良好水溶性、成膜性，抗炎、螯合重金属等作用，在医用材料领域应用前景广阔。本实验研究旨在讨论壳聚糖基纤维的止血和促进创面愈合的效果，并对其作用机理进行初步探讨，为其作为创伤止血愈创材料提供一定的理论依据。
方法：1、实验所用壳聚糖基纤维性质评价，运用电位滴定、红外光谱等方法对纤维的理化性质进行评价，通过溶血实验、全身急性毒性实验、皮内刺激实验和细胞毒性实验评价了纤维的生物相容性；2、以新西兰白兔为实验动物，切除兔肝脏左叶部分组织，形成肝脏敞开型创面出血模型。设立实验组、对照组和空白组，实验组使用壳聚糖基纤维敷于创面处，空白组使用普通纱布，对照组使用速即纱。通过测定每组的止血成功率和出血量，评价纤维的止血效果；通过血液凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(FIB)的测定、血液流变学、红细胞聚集和血小板粘附等实验研究了纤维对血液不同组分的作用，初步探讨了纤维的止血机理；3、以大白鼠为实验动物，在鼠肝脏左叶上制造5mm×3mm×2mm的创面，实验组将壳聚糖基纤维敷于创面上，对照组敷以速即纱，定期进行肉眼观察和行组织学检查，评价创面的粘连、炎症浸润和组织增生情况，以此反映纤维促进创面愈合的作用。以体外培养大鼠肝实质细胞BRL为研究对象，对纤维促肝细胞生长的作用进行评价。
结果：1、实验所用壳聚糖基纤维符合医用材料要求，无菌无热原；溶血实验表明壳聚糖基纤维无溶血作用，相容性实验表明纤维无急性毒性和皮内刺激性，细胞毒性实验结果表明壳聚糖基纤维对L929成纤维细胞没有毒性作用，并且对L929细胞增殖有一定的促进作用，其中以100μg/mL浓度时对L929细胞的促增殖作用最为显著；2、以新西兰白兔肝脏左叶部分切除为出血模型的实验中，结果表明实验组的止血成功率为100％，出血量为0.443±0.030g，在止血率和出血量指标上均优于对照组和空白组(P<0.05)；PT、FIB、APTT和TT的测定结果表明不同浓度的壳聚糖基纤维溶液对PT和APTT没有明显的作用，能使FIB浓度明显升高，且随着溶液浓度的增加FIB浓度逐渐增加，TT随溶液浓度的增加而缩短；血液流变学测定结果显示壳聚糖基纤维溶液在高、中、低切变率下均能使全血粘度升高；壳聚糖基纤维能显著促进红细胞的沉降，且随着溶液浓度的增加沉降量增加，同时能促进红细胞发生叠连；壳聚糖基纤维能够吸附血小板，促进血小板的聚集；3、在促进创面愈合的动物活体实验中，组织学切片观察结果表明实验组材料体内降解时间短、炎症细胞浸润少，创面愈合效果明显优于对照组；壳聚糖基纤维能促进肝细胞的的生长，在100μg/mL浓度时促进作用最为显著。
结论：本研究中的壳聚糖基纤维符合生物医用材料的要求，具有良好的生物相容性和生物可降解性，在体内和体外止血作用显著，效果明显优于速即纱，粘附创面的能力强，用于肝创面止血后，局部刺激反应少，降解吸收快，能诱导肝细胞的再生，因而是一种良好、安全的止血和促进创面愈合的材料。
壳聚糖基纤维;止血作用;创面愈合;肝脏外伤手术;医用材料
中国海洋大学
硕士
海洋生物学
刘万顺
2009
中文
R282.77
76
2009-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）