罗氏海盘车（Asterias rollestoni）水溶性海星皂苷的分离纯化及其部分生物学活性研究
海星皂苷是具有广泛生理和药理活性的天然海洋活性物质。目前，对海星皂苷的提取主要采用稀醇萃取法，这种方法存在着有机溶剂使用量大、成本高、易污染环境、不利于工业化推广等一系列缺点，而且更为重要的是所得海星皂苷水溶性较差，在应用方面受到很大限制。
本文旨在利用水抽提法、大孔树脂吸附、硅胶柱层析以及Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱等方法对水溶性海星皂苷进行提取和分离纯化，并从中筛选出具有较强抗真菌和抗肿瘤活性的单体组分。
水溶性海星皂苷性质鉴定结果显示，利用水抽提、大孔树脂吸附所得水溶性海星皂苷粗品为甾体皂苷。抗真菌活性的鉴定结果表明，水溶性海星皂苷粗品对黑曲霉(Aspergillus niger)、白色念珠菌(Candida albicans)、啤酒酵母菌(Saccharomyes cerevisise)、裂殖酵母菌(Schizosaccharomyce sprobe)、黄瓜枯萎病原菌(Fusarium oxysporumf sp.cucumerinum)、葡萄炭疽病原菌(Colletotrichumgloeosporioides)6种真菌均具有显著的抗真菌活性，其最低抑菌浓度分别为0.625、0.625、0.313、0.156、1.25和0.625 mg/mL。抗肿瘤活性的鉴定结果显示，水溶性海星皂苷粗品对体外培养的HeLa宫颈癌细胞、SGC-7901胃癌细胞、A-549肺癌细胞和Bel-7402肝癌细胞均具有显著的抗肿瘤活性，其IC50值分别为14.66、15.37、13.44和12.74μg/mL对水溶性海星皂苷粗品进行硅胶柱层析，分离纯化得到4种水溶性海星皂苷纯化组分pSF-1、pSF-2、pSF-3和pSF-4。抗真菌活性的筛选结果表明，pSF-3和pSF-4具有显著的抗真菌活性。抗肿瘤活性筛选结果表明pSF-3和pSF-4具有显著的抗肿瘤活性，其中pSF-3对HeLa宫颈癌细胞、SGC-7901胃癌细胞、A-549肺癌细胞和Bel-7402肝癌细胞的IC50值分别为7.05、5.28、5.32、6.16μg/mL；pSF-4对HeLa宫颈癌细胞、SGC-7901胃癌细胞、A-549肺癌细胞和Bel-7402肝癌细胞的IC50值分别为7.24、5.94、5.24、6.21μg/mL。
利用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱对硅胶柱层析组分进行纯化，并利用高效液相色谱(HPLC)对其纯度进行了测定，结果表明SF-3单体组分纯度很高，达96％以上。
对SF-3单体组分进行体内外抗肿瘤活性研究结果表明，2.5、5和10μg/mL的SF-3单体组分对体外培养的HeLa和肝癌细胞具有显著的抑制作用；灌胃剂量为2、5和10mg/kg体重的SF-3单体组分能够显著抑制小鼠S180移植瘤的生长，其抑制率分别为23.34％、36.33％和46.53％，在较高剂量下能够显著提高S180荷瘤小鼠的胸腺指数和脾脏指数。
综上所述，本文利用水抽提、大孔树脂吸附、硅胶柱层析以及Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析等方法得到了具有显著生物学活性的水溶性海星皂苷单体组分SF-3，有望应用于天然抗肿瘤海洋药物的研制，同时对于深入研究棘皮动物水溶性皂苷的性质及其生物学活性也具有重要参考价值。
海星皂苷;分离纯化;水抽提法;大孔树脂吸附;硅胶柱层析
中国海洋大学
硕士
细胞生物学
樊廷俊
2008
中文
R284;R285
69
2008-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）