部分南海微藻的分子鉴定及富油藻株的筛选

冯甜

中国海洋大学

摘要：

南海水域辽阔，地质、气候等环境条件复杂，蕴含丰富的生物资源，是能源微藻资源库。本研究以从南海分离到的微藻细胞为对象，利用分子生物学手段进行分类鉴定，通过测定其生长指标及含油量，筛选出生长快速、油脂含量高的藻种，为微藻生物柴油的生产提供了更多的原材料。　　具体的工作内容和结果如下：　　1.通过交互使用微吸管法、96孔板稀释法、水滴法、平板法，从141个水样中分离纯化出57株纯种微藻，获得了丰富的藻种资源。其中稀释法效果最好，但得到的藻种种类较单一，一般为优势藻种。　　2.利用18S核糖体RNA基因(rDNA)对分离纯化得到的57株纯种藻细胞进行分子鉴定，共鉴定出11种不同种类的藻细胞，其中8种被鉴定到属，1种被鉴定到科，2种被鉴定到目。鉴定结果如下：1、5、7、11、21、29、59、72号藻株分别为Bodo属、Pavlova属、Cafeteria属、Paraphysomonas属、Chlamydomonas属、Pycnococcus属、Psammodictyon属、Caecitellus属，55号藻株属于Bacillariaceae科，54号藻株属于Chlorellales目，109号藻株属于Chromulinales目。这一结果验证了分子鉴定在微藻分类鉴定中的高效性。　　3.对11株已鉴定的藻株进行生理生化分析，通过光密度法测定藻细胞浓度，观察藻细胞生长曲线，54号和109号藻株从进入指数生长期到指数生长期结束生长明显比其他藻株迅速；54、55、109、1号藻株比生长速率相对较高，其中54号藻株比生长速率最高，达到0.4415/d；利用冷冻干燥后称重的方法测定终生物量，59、72号藻株终生物量明显高于其他藻株，59号藻株终生物量最大，达到167.33?g/mL；通过重量法测定总脂含量，54、109、59号藻株总脂含量相对较高，其中54号藻株总脂含量最高，达到藻细胞干重的40.42％；54、59、109号油脂产率明显高于其他藻株，59号藻株油脂产率最大，达到46.46g/mL。综合考虑各方面因素，54号、59号、109号藻株生长较迅速、油脂含量较高，比较适合用作微藻生物柴油原材料。

关键词：微藻细胞;分子鉴定;生物柴油;生长指标;含油量

授予单位：中国海洋大学

授予学位：硕士

学科专业：生物工程

导师姓名：潘克厚;杨官品

学位年度：2013

语种：中文

分类号：TE667;Q949.2

页数：80

在线出版日期：2013-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）